□ 아바멕틴(Abamectin) 등 27종 다성분 시험법

-난백분의 피프로닐 시험법은 난황분과 전란분도 적용 가능함

가. 시험법 적용범위

닭고기 및 알(난백분 포함)에 적용한다.

나. 분석원리

검체 중 대상성분을 1% 아세트산 포함 아세토니트릴로 추출하고, 원심분리하여 상층액을 취해 PSA(primary secandary amine), C18을 이용하여 정제한 후 액체크로마토그래프-질량분석기로 분석한다.

다. 장치

1) 액체크로마토그래프-질량분석기(LC-MS/MS)

라. 시약 및 시액

1) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 특급

2) 물 : 3차 증류수 또는 이와 동등한 것

3) 표준원액 : 표준품을 메탄올에 녹여 1,000 mg/L가 되게 한다.

4) 표준용액 : 표준원액을 무처리 시료 추출물을 이용하여 적당한 농도로혼합 희석한다.

5) 기타시약 : 잔류농약 시험용 또는 특급

마. 시험용액의 조제

1) 추출

검체를 분쇄하여 균질화한 후 5 g을 정밀히 달아(난백분은 1 g, 물 10 mL 가하여 5분 이상 방치) 50 mL 원심분리관에 넣고 1% 아세트산을 포함한 아세토니트릴 15 mL를 가한 뒤 1분간 강하게 흔든 후, 무수 황산마그네슘 6 g 과 무수아세트산나트륨 1.5 g을 차례로 가하고 10분간 진탕한다. 진탕 후 추출물을 4℃, 4000 G에서 10분간 원심분리한다.

2) 정제

무수 황산마그네슘 1200 mg, C18 400 mg, PSA(Primary-secondary amine) 400 mg 과 GCB(Graphitized carbon black) 45 mg이 담긴 50 mL 원심분리관에 ‘1)추출’로부터 얻은 용액 중 상등액 6 mL(난백분의 경우 상등액 모두)를 넣고 1분간 강하게 흔들고 이를 4℃, 4000 G에서 10분간 원심분리한다. 정제된 상층액 중 3 mL(난백분의 경우 상층액 모두)을 취하여 질소로 농축한 후 메탄올을 가하여 최종부피 1 mL가 되게 한 뒤 멤브레인필터(nylon, 0.2 μm)로 여과한 후 시험용액으로 한다.

바. 시험조작

1) 액체크로마토그래프 측정조건

가) 칼럼 : C18(Phenomenex synergi fusion, 2.0 mm i.d. × 50 mm, 4 μm) 또는 이와 동등한 것

나) 칼럼온도 : 40℃

다) 이동상

(1) 이동상 A : 0.1% 포름산 함유 메탄올

(2) 이동상 B : 0.1 % 포름산 및 5 mM 아세트산 암모늄 함유 물

시간(분)	A(%)	B(%)
0.0	5	95
3.0	90	10
7.0	90	10
7.1	5	95
12.0	5	95

라) 이동상 유량 : 0.2 mL/분

마) 주입량 : 2 μL

2) 질량분석기 측정조건

가) 이온화 방법 : ESI positive-ion mode

나) Capillary voltage : 5.5 kV

다) Collision gas : 질소(N2)

표. 액체크로마토그래프-질량분석기 분석을 위한 특성이온

분석성분	RT (min)	분자량 (MW)	관측질량 (Exact mass)	선구이온 (Precursor ion, m/z)	생성이온 (Product ion, m/z)	충돌에너지 (Collision energy, eV)
2,4-dimethylaniline*	2.34	121.2	121.08		107	21
				122	105	23
					77	37
Abamectin	5.48	873.1	872.49		305	37
				890	95	95
					569	21
Amitraz*	5.41	293.4	293.18		163	23
				294	107	57
					106	83
Bifenthrin	5.9	422.9	422.12		181	17
				440	165	93
					166	57
Carbaryl	4.16	201.2	201.07		145	15
				202	127	41
					117	33
Clotianidin	3.46	249.7	249.00		169	17
				250	132	23
					113	35
Cypermethrin	5.47	416.3	415.07		191	21
				433	127	43
					91	69
Diazinon	4.9	304.3	304.10		169	29
				305	153	27
					97	43
Dichlorvos	4.03	221.0	219.94		109	23
				221	79	37
					95	47
Ethoxazole	5.37	359.4	359.16		141	43
				360	113	85
					304	25
Fenitrothion	3.57	277.2	277.01		174	19
				295	154	45
					278	9
Fenobucarb	4.47	207.3	207.12		95	19
				208	77	53
					152	11
Fensulfothion	4.4	308.4	308.03		281	21
				309	253	25
					173	33
Fipronil	4.68	437.1	435.93		368	25
				437	255	41
					290	37
Flufenoxuron	3.57	488.8	488.03		261	17
				487	111	57
					97	71
Imidacloprid	3.53	255.7	255.05		209	21
				256	175	25
					73	65
Isofenphos	4.93	345.4	345.11		245	17
				346	217	31
					121	51
Ivermectin**	5.76	875.1	874.50		569	21
				892	307	35
					551	29
Methamidophos	4.43	141.1	141.00		94	21
				142	125	29
					47	35
Methidathion	4.41	302.3	301.96		145	17
				303	85	27
					58	39
Monocrotophos	3.22	223.2	223.06		127	21
				224	58	33
					109	43
Phorate	3.6	260.4	260.01		75	19
				261	47	43
					29	59
Phorate oxon	4.39	244.3	244.03		75	15
				245	47	37
					29	69
Phorate oxon sulfone	3.63	276.3	276.02		111	39
				277	81	59
					99	35
Phorate oxon sulfoxide	3.6	260.3	260.03		111	29
				261	97	31
					81	67
Phorate sulfone	4.27	292.4	292.00		171	17
				293	97	39
					115	33
Phorate sulfoxide	4.26	276.4	276.00		199	13
				277	97	41
					143	29
Pirimiphos methyl	4.96	305.3	305.09		164	29
				306	108	37
					67	59
Propoxur	4.01	209.3	209.10		65	43
				210	111	21
					93	29
Pyridaben	5.55	364.9	364.13		147	33
				365	309	17
					117	89
Spiromesifen	5.35	370.5	370.21		273	15
				371	255	33
					187	37
Sulfoxaflor	3.62	277.3	277.04		111	35
				278	81	63
					75	25
Trichlorfon	3.19	257.4	255.92		109	21
				257	79	43
					83	67

※ 밑줄 표시 되어 있는 것은 정량이온이며, 그 외는 정성이온임

※ 각 생성이온(Product ion)에 대한 질량분석기의 기기조건은 사용기기의 최적값으로 변경하여 사용할 수 있으며, 제시된 이외의 생성이온도 적용이 가능함.

※ 이 시험법을 이용하여 위의 분석대상 성분 중 * 표시된 농약이 닭고기 또는 알에서 검출될 경우 정량분석은 첨부의 아미트라즈 시험법을 따르고, ** 표시된 농약이 닭고기 또는 알에서 검출될 경우 정량분석은 식품공전 내 계열별 분석법으로 한다.

3) 검량선 작성

농도별 표준 용액을 일정량 취하여 무처리 시료 추출 용액과 각각 혼합 한 후 액체크로마토그래프-질량분석기에 각각 주입한다. 얻은 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성한다.

4) 표준품의 크로마토그램

그림. 액체크로마토그래프-질량분석기에서 표준품의 크로마토그램

5) 정량한계

구분	정량한계(mg/kg)
농약	닭고기	알
2,4-dimethylaniline	-	-
Abamectin	0.01	0.01
Amitraz	-	-
Bifenthrin	0.005	0.005
Carbaryl	0.005	0.005
Clotianidin	0.01	0.01
Cypermethrin	0.005	0.005
Diazinon	0.005	0.005
Dichlorvos	0.01	0.01
Ethoxazole	0.005	0.005
Fenitrothion	0.005	0.005
Fenobucarb	0.005	0.005
Fensulfothion	0.005	0.005
Fipronil	0.005	0.01
Flufenoxuron	0.005	0.005
Imidacloprid	0.005	0.005
Isofenphos	0.005	0.005
Ivermectin	-	-
Methamidophos	0.01	0.01
Methidathion	0.005	0.005
Monocrotophos	0.005	0.005
Phorate	0.005	0.005
Phorate oxon	0.005	0.005
Phorate oxon sulfone	0.005	0.005
Phorate oxon sulfoxide	0.005	0.005
Phorate sulfone	0.005	0.005
Phorate sulfoxide	0.005	0.005
Pirimiphos methyl	0.005	0.005
Propoxur	0.005	0.005
Pyridaben	0.005	0.005
Spiromesifen	0.005	0.005
Sulfoxaflor	0.01	0.01
Trichlorfon	0.01	0.01

표.  정량이 가능한 농약

※ 정성만 가능한 물질은 ‘-’로 표시

사. 정량시험

위 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크가 표준용액 피크의 머무름시간과 일치할 때 피크 높이 또는 면적을 검량선에 대입하여 정량한다.

아. 확인시험

액체크로마토그래프-질량분석기상의 머무름 시간과 특성이온으로 확인한다.

첨부. 아미트라즈 시험법

(첨부) 아미트라즈(Amitraz) 시험법

가. 시험법 적용범위

닭고기 및 알에 적용한다.

나. 분석원리

검체 중 분석대상물질을 아세토니트릴, 황산마그네슘, 염화나트륨, 시트르산나트륨, 시트르산수소나트륨 또는 헥산, 이소프로필알코올, 수산화나트륨으로 추출하여 C18 으로 정제한 후 액체크로마토그래프/질량분석기로 분석한다.

다. 장치

1) 액체크로마토그래프/질량분석기(LC-MS/MS)

라. 시약 및 시액

1) 용매 : 액체크로마토그래프용 또는 이와 동등한 것

2) 물 : 3차 증류수 또는 이와 동등한 것

3) 표준원액 : 100 mL 용량플라스크에 아미트라즈, 2,4-디메틸아닐린(2,4-Dimethylaniline, 아미트라즈대사체)표준품을 정밀히 달아 아세토니트릴에 녹여 100 mg/L가 되게 한다. 조제된 표준원액은 냉동 보관한다.

4) 혼합표준용액 : 100 mL 용량플라스크에 각 표준원액을 아세토니트릴로 희석하여 적당한 농도가 되게 한다.

5) 10 mM 포름산암모늄(Ammonium formate) 용액: 1,000 mL 용량플라스크에 포름산암모늄 0.63 g을 넣고 물로 표시선까지 채운다.

6) 0.1% 포름산(Formic acid) 함유 메탄올 용액: 1,000 mL 용량플라스크에 포름산 1 mL을 넣고 메탄올로 표시선까지 채운다.

7) 0.1 M 수산화나트륨용액 : 1,000 mL 용량플라스크에 수산화나트륨(NaOH) 4.04 g을 넣고 물로 녹여 표시선까지 채운다.

8) 기타시약: 특급 또는 이와 동등한 것

마. 시험용액의 조제

1) 가금육

균질화한 검체 5 g을 50 mL 원심분리관에 취하고 아세토니트릴 10 mL을 가한 후 1분간 진탕한다. 여기에 황산마그네슘 4 g, 염화나트륨 1 g, 시트르산나트륨 1 g, 시트르산수소나트륨 0.5 g을 가한 뒤 1분간 진탕하고 4℃에서 2,700 G로 10분간 원심분리한다. 새로운 15 mL 원심분리관에 상층액을 취하여 40°C 수용액상에서 질소농축한 후 아세토니트릴 1 mL를 가하여 재분산한다. 이를 5분간 초음파처리한 후, 4℃에서 13,500 G로 3분간 원심분리하여 상층액을 취하고 0.2 µm 막여과지(PTFE membrane filter)로 여과시킨 후 시험용액으로 한다.

2) 알

균질화한 검체 2 g을 15 mL 원심분리관에 취한다. 여기에 0.1 M 수산화나트륨용액 2 mL, 헥산 4 mL, 이소프로필알코올 1.2 mL을 가한 뒤 1분간 진탕한 후 4℃에서 2,700 G로 5분간 원심분리하여 상층액 ⓐ를 취한다. 잔류물에 다시 0.1 M 수산화나트륨용액 2 mL, 헥산 4 mL, 이소프로필알코올 1.2 mL을 가한 뒤 1분간 진탕한 후 4℃에서 2,700 G로 5분간 원심분리하여 상층액 ⓑ를 취한다. 새로운 50 mL 원심분리관에 상층액 ⓐ와 ⓑ를 합한 후 40°C 수용액상에서 질소농축한 후 아세토니트릴 1 mL를 가하여 재분산한다. 이를 5분간 초음파처리한 후, 4℃에서 13,500 G로 3분간 원심분리하여 상층액을 취하고 멤브레인필터(PTFE, 0.2 μm)로 여과한 후 시험용액으로 한다.

바. 시험조작

1) 액체크로마토그래프 측정조건

가) 칼럼: C18 (Phenomenex Luna, 2.0 × 150 mm, 5 μm) 또는 이와 동등한 것

나) 칼럼온도: 40℃

다) 이동상

(1) 이동상 A : 0.1% 포름산 함유 메탄올

(2) 이동상 B : 10 mM 포름산암모늄 용액

시간(분)	A(%)	B(%)
0	10	90
3	100	0
9	100	0
10	10	90
15	10	90

라) 이동상 유량 : 0.25 mL/분

마) 주입량: 10 μL

2) 질량분석기 조건

가) 이온화 방법: ESI positive-ion mode

나) Gas Temperature: 350℃

다) Collision gas: 질소(N2)

표. 액체크로마토그래프-질량분석기 분석을 위한 특성이온

연번	물질명 (Compound)	머무름 시간(분)	분자량 (MW)	선구이온 (Precursor ion, m/z)	생성이온 (Product ion, m/z)	충돌에너지 (Collision Energy, eV)
1	아미트라즈 (Amitraz)	9.2	293.41	294	163	19
					122	43
					107	59
2	2,4-디메틸아닐린 (2,4-Dimethylaniline)	6.7	121.18	122	107	23
					77	39
					105	23

※ 밑줄 표시 되어 있는 것은 정량이온이며 그 외 이온들은 정성이온임

※ 각 생성이온(Product ion)에 대한 질량분석기의 기기조건은 사용기기의 최적값으로 변경하여 사용할 수 있으며, 제시된 이외의 생성이온도 적용이 가능함

사) 정성시험

1) 정성

위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크는 표준용액 피크의 머무름 시간과 비교하여 일치하여야 한다. 또한 표준용액과 시험용액의 선구이온(Precursor ion) 및 생성이온(Product ion)이 일치하여야 하고, 표준용액과 시험용액의 생성이온간 반응세기의 비율(Response ratio)을 비교하여 그 비율은 주1)과 일치하여야 한다.

주1. 생성이온간 반응세기의 비율 허용범위

이온간 반응세기의 비율(%)	허용범위
> 50 %	≤ 20 %
> 20 %, ≤ 50 %	≤ 25 %
> 10 %, ≤ 20 %	≤ 30 %

2) 표준품 크로마토그램

아미트라즈(9.2분)

2,4-디메틸아닐린(6.7분)

그림 1. 아미트라즈, 2,4-디메틸아닐린 표준품의 크로마토그램 (각 0.005 mg/L)

아. 정량시험

1) 정량

정성시험과 똑같은 조건에서 표준용액을 일정농도로 제조한 후 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성하고, 시험용액의 크로마토그램으로부터 정량이온(Quantitative ion)의 각 피크 높이 또는 피크 면적에 따라 각각 정량한다.

2) 정량한계

아미트라즈(Amitraz): 0.001 mg/kg

2,4-디메틸아닐린(2,4-Dimethylaniline): 0.005 mg/kg

□ 스피노사드(Spinosad) 시험법

가. 시험법 적용범위

닭고기 및 알에 적용한다.

나. 분석원리

검체 중 스피노사드를 아세토니트릴로 추출하고, 황산마그네슘, 아세트산나트륨을 가하여 원심분리한 상층액을 취해 정제한 후 액체크로마토그래프-질량분석기로 분석한다.

다. 장치

1) 액체크로마토그래프-질량분석기(LC-MS/MS)

라. 시약 및 시액

1) 용매: 잔류농약 시험용 또는 특급

2) 물: 3차 증류수 또는 이와 동등한 것

3) 표준원액: 스피노신 A 및 스피노신 D 표준품을 각각 아세토니트릴에 녹여 100 mg/L가 되게 하여 갈색병에 보관한다.

4) 표준용액: 표준원액을 아세토니트릴로 적당한 농도로 희석한다.

5) 기타시약: 잔류농약 시험용 또는 특급

마. 시험용액의 조제

1) 추출

균질화한 검체 5 g(알은 10 g)을 정밀히 달아 50 mL 원심분리관에 취하여 아세토니트릴 20 mL(알은 10 mL)를 가한 뒤 1분간 균질화 한 후, 황산마그네슘 6 g과 아세트산나트륨 1.5 g을 차례로 가하고 1분간 진탕한다. 진탕 후 추출물을 4,000 rpm으로 5분간 원심분리 한다. 상층액 1.5 mL을 2.0 mL 원심분리관에 옮긴 후 다중벽 탄소나노튜브(multi-wall carbon nano tubes) 6 mg과 황산마그네슘 225 mg을 가하고 10초간 진탕한 후 4,000 rpm으로 5분간 원심분리한다. 상층액 1 mL에 아세토니트릴 1.5 mL를 가하여 혼합하고(알의 경우 상층액 1mL만 취함) 멤브레인필터(PTFE, 0.2 μm)로 여과한 후 갈색 바이알에 옮겨 시험용액으로 한다.

바. 시험조작

1) 액체크로마토그래프 분석조건

가) 칼럼: C18(Agilent Eclipse Plus, 3.0 mm i.d. × 150 mm, 3.5 μm) 또는 이와 동등한 것

나) 칼럼 온도: 30℃

다) 이동상

(1) 이동상 A: 아세토니트릴

(2) 이동상 B: 0.1% 포름산 함유 물

시간(분)	A(%)	B(%)
0.0	10	90
4.0	100	0
5.0	100	0
7.0	10	90
10.0	10	90

라) 이동상 유속: 0.3 mL/분

마) 주입량: 5 μL

2) 질량분석기 분석조건

가) 이온화 방법: ESI positive-ion mode

나) Capillary Voltage: 3.5 kV

다) Collision gas: 아르곤(Ar)

라) Cone voltage: 42 V

표. 액체크로마토그래프-질량분석기 분석을 위한 특성이온

분석성분 (Compound)	평균 분자량 (MW)	관측질량 (Exact mass)	선구이온 (Precursor ion, [M+H]+, m/z)	생성이온 (Product ion, m/z)	충돌에너지 (Collision energy, eV)
스피노신 A (Spinosyn A)	732.0	731.46	732	142	46
				98	60
스피노신 D (Spinosyn D)	746.0	745.47	746	142	42
				189	50

1) 밑줄 표시 되어 있는 것은 정량이온이며, 그 외는 정성이온임

※ 각 생성이온에 대한 질량분석기의 기기조건은 사용기기의 최적값으로 변경하여 사용할 수 있으며, 제시된 이외의 생성이온도 적용이 가능함.

3) 검량선 작성

표준용액을 농도별로 일정량 취하여 액체크로마토그래프-질량분석기에 각각 주입하여 얻은 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적값으로 검량선을 작성한다.

4) 표준품의 크로마토그램

그림. 액체크로마토그래프-질량분석기에서 표준품의 크로마토그램

스피노신 A(A: 4.95분), 스피노신 D(B: 5.01분)

5) 정량한계

가) 0.001 mg/kg(알)

나) 0.01 mg/kg(닭고기)

사. 정량시험

위 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크가 표준용액 피크의 머무름시간과 일치할 때 피크 높이 또는 면적을 검량선에 대입하여 정량한다.

아. 확인시험

액체크로마토그래프-질량분석기상의 머무름 시간과 특성이온으로 스피노신 A와 스피노신 D를 확인한다.

□ 카탑(Cartap), 티오사이클람(Thiocyclam) 시험법

가. 시험법 적용범위

닭고기 및 알에 적용한다.

나. 분석원리

검체 중 카탑, 티오사이클람을 2% 시스테인 염산용액, 3% 염화니켈 용액 및 암모니아수를 사용하여 네레이스톡신(nereistoxin)으로 전환시켜 헥산 및 아세토니트릴로 추출한 후 액체크로마토그래프-질량분석기로 분석한다.

다. 장치

1) 액체크로마토그래프-질량분석기(LC-MS/MS)

라. 시약 및 시액

1) 용매: 잔류농약 시험용 또는 특급

2) 물: 3차 증류수 또는 이와 동등한 것

3) 표준원액: 옥살산수소 네레이스톡신(nereistoxin hydrogen oxalate) 표준품을 아세토니트릴에 녹여 네레이스톡신(nereistoxin)으로써 100 mg/L가 되게 한다.

4) 표준용액: 표준원액을 무처리시료 추출물을 이용하여 적당한 농도로 혼합, 희석한다.

5) 2% 시스테인(cysteine) 용액: 무수염산시스테인(L-cysteine-HCl, anhydrous) 20 g을 0.02 N 염산 용액 950 mL에 녹인 후 10 N 수산화나트륨 용액을 첨가하여 pH 3로 맞춘 다음 0.02 N 염산용액을 첨가하여 1,000 mL가 되게 한다.

6) 3% 염화니켈(nickel chloride) 용액: 염화니켈 3 g을 물에 녹여 100 mL가 되게 한다.

7) 기타시약: 잔류농약 시험용 또는 특급

마. 시험용액의 조제

1) 추출

균질화한 시료 10 g을 정밀히 달아 50 mL 원심분리관에 취하여 2% 시스테인 용액 40 mL(우유와 계란의 경우 30 mL)를 가하고  30분간 진탕 추출한다(단, 추출액의 pH가 4∼5 범위를 벗어날 경우, 2 N 염산용액으로 조절한 후 30분간 다시 진탕 추출한다). 이를 4,000 rpm, 4℃에서 10분간 원심분리한 후 상층액 20 mL를 별도의 50 mL 원심분리관에 취한다(계란의 경우 상층액을 별도의 50 mL 원심분리관에 옮긴 후 추출용액으로 전체 부피를 40 mL로 한 다음 그 중 20 mL를 취한다). 여기에 3% 염화니켈 용액과 진한 암모니아수를 각각 1.5 mL씩 첨가한 다음 5분간 진탕한 후 70℃ 수욕상에서 1시간 동안 진탕 반응 시킨다. 반응이 끝난 추출액을 냉각시킨 다음 10 N 황산 용액을 첨가하면서 pH 5로 맞춘 후 헥산 10 mL를 가하여 진탕한다. 이를 4,000 rpm, 4℃에서 10분간 원심분리한 후 상층액을 버린 다음 10 N 수산화나트륨 용액을 첨가하면서 pH 9로 맞춘다. 여기에 염화나트륨 6 g과 아세토니트릴 20 mL을 가한 후 진탕하고, 다시 4,000 rpm, 4℃에서 10분간 원심분리한 다음 상층액(아세토니트릴 층)을 멤브레인 필터(PTFE, 0.45 μm)로 여과한 후 시험용액으로 한다.

바. 시험조작

1) 액체크로마토그래프 분석조건

가) 칼럼: HILIC(Waters XBridge, 2.1 mm i.d. × 100 mm, 3 μm) 또는 이와 동등한 것

나) 칼럼 온도: 40℃

다) 이동상: 0.1% 포름산 함유 아세토니트릴/0.1% 포름산 함유 물(90/10, v/v)

라) 이동상 유속: 0.4 mL/분

마) 주입량: 5 μL

2) 질량분석기 분석조건

가) 이온화 방법 : ESI positive-ion mode

나) Capillary voltage: 4.0 kV

다) Collision gas: 아르곤(Ar)

라) Cone voltage: 12 V

표. 액체크로마토그래프-질량분석기 분석을 위한 특성이온

분석성분 (Compound)	평균 분자량 (MW)	관측질량 (Exact mass)	선구이온 (Precursor ion, [M+H]+, m/z))	생성이온 (Product ion, m/z)	충돌에너지 (Collision energy, eV)
네레이스톡신 (Nereistoxin)	149.0	149.03	150	105	12
				71	36

1) 밑줄 표시 되어 있는 것은 정량이온이며, 그 외는 정성이온임

※ 각 생성이온에 대한 질량분석기의 기기조건은 사용기기의 최적값으로 변경하여 사용할 수 있으며, 제시된 이외의 생성이온도 적용이 가능함.

3) 검량선 작성

표준용액을 농도별로 일정량 취하여 액체크로마토그래프-질량분석기에 각각 주입하여 얻은 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적값으로 검량선을 작성한다.

4) 표준품의 크로마토그램

그림. 액체크로마토그래프-질량분석기에서 표준품의 크로마토그램

네레이스톡신: 1.6분

5) 정량한계

0.005 mg/kg

사. 정량시험

위 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크가 표준용액 피크의 머무름시간과 일치할 때 피크 높이 또는 면적을 검량선에 대입하여 정량한다.

아. 확인시험

액체크로마토그래프-질량분석기상의 머무름 시간과 특성이온으로 네레이스톡신을 확인한다.