식품의약품안전처 고시 제2018-18호

식품의 기준 및 규격 일부개정고시

2018.3.20.

식품의약품안전처

식품의약품안전처 고시 제2018-18호

식품의 기준 및 규격 일부개정고시

1. 개정 이유

국내외에서 사용되는 농약과 동물용의약품의 잔류허용기준을 개정 및 신설하고 관련시험법을 마련하여 식품 안전관리를 하고자 함

2. 주요 내용

가. 일반시험법 신설[제7. 7.1.4.211, 7.1.4.212, 제7. 8.3.51, 제7. 8.3.113, 제7. 8.3.118∼121]

1) 기준 신설, 국내외 사용 등 안전관리가 필요한 농약, 동물용의약품의 시험법 신설 필요

2) 식품 중 플룩사메타마이드 등 2종 농약 시험법 신설

3) 식품 중 아미트라즈 등 2종 동물용의약품 시험법 개정 및 에마멕틴 등 4종 시험법 신설

4) 시험법 개정 및 신설로 시험결과의 정확성 및 신뢰도 향상

나. 농산물 중 농약 잔류허용기준 신설 및 개정[별표 3 중 (20) 다이쾃, (55) 뷰프로페진, (69) 사이헥사틴, (90) 엔도설판, (96) 옥사밀, (97) 옥시풀루오르펜, (101) 이미다클로프리드, (111) 카바릴, (116) 카탑, (133) 테부코나졸, (135) 터부포스, (156) 파클로부트라졸, (173) 포레이트, (206) 클로르페나피르, (210) 페나자퀸, (234) 펜피록시메이트, (238) 플루디옥소닐, (246) 스피노사드, (248) 아바멕틴, (249) 에마멕틴 벤조에이트, (259) 피리메타닐,  (290) 인독사카브, (292) 퀸클로락, (309) 플루톨라닐, (323) 보스칼리드, (332) 클로티아니딘, (352) 메톡시페노자이드, (357) 디티오카바메이트, (370) 벤티아발리카브아이소프로필, (403) 메타플루미존, (404) 메트라페논, (408) 스피네토람, (421) 레피멕틴, (433) 사이안트라닐리프롤, (435) 펜피라자민, (437) 플룩사피록사드, (441) 피리벤카브, (442) 플루피라디퓨론, (459) 피플루뷰마이드, (460) 피카뷰트라족스, (461) 벤조빈디플루피르, (465) 톨펜피라드, (467) 플룩사메타마이드, (468) 티아페나실, (469) 플루트리아폴]

1)「농약관리법」에 신규 등록된 농약의 안전관리 및 수입 농산물에 농약 잔류허용기준 설정 신청에 따른 관련 기준 신설 및 개정 필요

2) 다이쾃 등 농약 45종의 농약 잔류허용기준 신설 및 개정

3) 농산물에 농약 잔류허용기준을 합리적으로 신설 및 개정하여 국민에게 안전한 식품 공급

다. 식품 중 동물용의약품 잔류허용기준 신설 및 개정[별표 5 중 (4) 노보비오신, (68)  델타메트린, (75) 트리클로르폰, (121) 사이퍼메트린,  (192) 프로폭서]

1) 허가되어 사용하고 있으나 잔류허용기준이 없는 동물용의약품의 잔류허용기준 신설 및 개정 필요

2) 노보비오신 등 동물용의약품 5종의 잔류허용기준 신설 및 개정

3) 동물용의약품 잔류허용기준을 신설 및 개정하여 국민에게 안전한 식품 공급

3. 기타 참고사항

가. 관계법령 : 「식품위생법」 제7조제1항

나. 예산조치 : 별도조치 필요 없음

다. 합    의 : 해당사항 없음

라. 기    타

1) 행정예고

가) 공고 제2017-473호, 2017. 12. 28.(2017. 12. 28.～2018. 2. 26.)

2) 식품 및 축산물위생심의위원회

가) 식품위생심의위원회 잔류물질분과 심의

: (1차)2017.8.18. (2차)2017.11.15.

나) 축산물위생심의위원회 잔류물질분과 심의

: (1차)2017.12.11. (2차) 2018.1.24∼30

3) 규제심사

가) 국무조정실 규제심사 대상여부: 규제심사 비대상(국조실 접수번호 제2017-3493호, 2017.12.7)

식품의약품안전처 고시 제2018-18호

「식품위생법」 제7조제1항에 따른 「식품의 기준 및 규격」(식품의약품안전처 고시 제2018-8호, 2018.2.22.)을 다음과 같이 개정 고시합니다.

2018년 3월 20일

식품의약품안전처장

식품의 기준 및 규격 일부개정고시

식품의 기준 및 규격 일부를 다음과 같이 개정한다.

제7. 7. 7.1.4.211∼212를 다음과 같이 신설한다.

7.1.4.211 플룩사메타마이드(Fluxametamide)

가. 시험법 적용범위

곡류, 서류, 두류, 과일류, 채소류 등의 식품에 적용한다.

나. 분석원리

검체 중 플룩사메타마이드를 아세토니트릴로 추출한 후 실리카 카트리지로 정제하여 액체크로마토그래프-질량분석기로 분석한다.

다. 장치

1) 액체크로마토그래프-질량분석기(LC-MS/MS)

라. 시약 및 시액

1) 용매: 잔류농약 시험용 또는 특급

2) 물: 3차 증류수 또는 이와 동등한 것

3) 표준원액: 플룩사메타마이드 표준품을 아세토니트릴에 녹여 1,000 mg/L가 되게 한다.

4) 표준용액: 표준원액을 무처리 시료 추출물을 이용하여 적당한 농도로 혼합, 희석한다(무처리 시료추출물 90% 이상 포함).

5) 실리카 카트리지: 고정상이 충전되어 있는 일회용 카트리지(용량 6 mL) 또는 이와 동등한 것

6) 기타시약: 잔류농약 시험용 또는 특급

마. 시험용액의 조제

1) 추출

검체를 분쇄하여 균질화 한 후 10 g (곡류 및 두류는 약 1 kg을 혼합하여 표준체 420 μm를 통과하도록 분쇄한 후 10 g, 서류, 과일류, 채소류는 약 1 kg을 분쇄한 후 10 g)을 정밀히 달고(곡류 및 두류의 경우 물 20 mL를 가한 후 30분간 방치) 아세토니트릴 50 mL를 가하여 진탕기에서 10분간 격렬하게 진탕한다. 추출물은 여과지 (Whatman, No. 2)가 깔려있는 부흐너깔때기에 통과시켜 흡인 여과, 여과액을 감압플라스크에 받는다. 아세토니트릴 20 mL로 잔사 및 용기를 씻어내려 앞서의 여과액과 합친 뒤 40℃ 이하 수욕 상에서 감압농축한다. 잔류물에 물 100 mL를 가하여 진탕, 혼합한 후 분액깔때기에 옮기고 염화나트륨 10 g을 가한 후 디클로로메탄 30 mL를 가하여 격렬하게 흔든 후 층이 완전히 분리될 때까지 정치하고, 디클로로메탄 층을 무수황산나트륨에 통과시켜 농축플라스크에 받는다. 수용액 층에 디클로로메탄 30 mL를 추가로 가하여 위의 과정을 반복하고 합친 분배 추출액을 40℃ 이하의 수욕 상에서 감압 농축, 용매를 완전 증발시킨다. 잔류물을 디클로로메탄 10 mL에 재용해한다[지방성 검체의 경우 잔류물을 아세토니트릴로 포화시킨 헥산 30 mL에 재용해하여 분액깔때기에 옮기고 헥산으로 포화시킨 아세토니트릴 30 mL씩으로 2회 분배 추출한다. 합친 아세토니트릴 층을 40℃에서 감압 농축, 용매를 완전 증발시킨 후 잔류물을 디클로로메탄 10 mL에 재용해한다.].

2) 정제

실리카 카트리지에 2～3 방울/초의 속도로 디클로로메탄 10 mL를 유출시켜 활성화한다. 고정상 상단이 노출되기 직전에 ‘1) 추출’로부터 얻은 추출액 5 mL를 가하여 1～2 방울/초의 속도로 유출시켜 버린다. 고정상 상단이 노출되기 직전에 아세톤/디클로로메탄용액(5/95, v/v) 용액 10 mL를 가하고 용출액을 증류플라스크에 받은 후 40℃ 이하 수욕 상에서 감압 농축, 용매를 완전 증발시킨다. 잔류물을 아세토니트릴 5 mL에 재용해한 후 멤브레인 필터(PTFE, 0.2 μm)로 여과하여 시험용액으로 사용한다.

바. 시험조작

1) 액체크로마토그래프 분석조건

가) 칼럼: C18 (Unison UK-C18, 2.1 mm I.D. × 100 mm L., 3.5 μm) 또는 이와 동등한 것

나) 칼럼 온도: 40℃

다) 이동상

(1) 이동상 A: 0.1% 포름산 함유 아세토니트릴

(2) 이동상 B: 0.1% 포름산 함유 물

(3) 농도 구배 조건

시간(분)	A(%)	B(%)
0.0	80	20
1.0	80	20
4.0	20	80
6.0	20	80
8.0	80	20
10.0	80	20

라) 이동상 유속: 0.2 mL/분

마) 주입량: 1 μL

2) 질량분석기 측정조건

가) 이온화 방법: ESI positive-ion mode

나) Capillary voltage:  3.0 kV

다) Collision gas: 아르곤 (Ar)

라) Cone voltage: 40 V

표. 액체크로마토그래프-질량분석기 분석을 위한 특성이온

분석성분 (Compound)	평균 분자량 (MW)	관측질량 (Exact mass)	선구이온 (Precursor ion, [M+H]+, m/z)	생성이온 (Product ion, m/z)	충돌에너지 (Collision energy, eV)
플룩사메타마이드 (Fluxametamide)	474.3	473.05	474	400	23
				160	38

※ 밑줄 표시 되어 있는 것은 정량이온이며, 그 외는 정성이온임.

※ 각 생성이온에 대한 질량분석기의 기기조건은 사용기기의 최적값으로 변경하여 사용할 수 있으며, 제시된 이외의 생성이온도 적용이 가능함.

3) 검량선 작성

표준용액을 농도별로 일정량 취하여 액체크로마토그래프-질량분석기에 각각 주입하여 얻은 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적 값으로 검량선을 작성한다.

4) 표준품의 크로마토그램

그림. 액체크로마토그래프-질량분석기에서 표준품의 크로마토그램

플룩사메타마이드(6.7분)

5) 정량한계

0.005 mg/kg

사. 정량시험

위 조건으로 얻은 크로마토그램상의 피크가 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치할 때 피크 높이 또는 면적을 검량선에 대입하여 정량한다.

아. 확인시험

액체크로마토그래프-질량분석기상의 머무름 시간과 특성이온으로 플룩사메타마이드를 확인한다.

7.1.4.212 티아페나실(Tiafenacil)

가. 시험법 적용범위

곡류, 서류, 두류, 과일류, 채소류 등의 식품에 적용한다.

나. 분석원리

검체 중 모화합물인 티아페나실과 대사산물 티아페나실 M36 [2-(2-chloro-4-fluoro-5-(3-methyl-2,6-dioxo-4-(trifluoromethyl)-2,3-dihydropyrimidin-1(6H)-yl)phenyl)sulfinyl)propanoic acid] 및 티아페나실 M56 [2-(2-chloro-5-(2,6-dioxo-4-(trifluoromethyl)-2,3-dihydro pyrimidin-1 (6H)-yl)-4-fluorophenyl)sulfinyl)propanoic acid]을 아세토니트릴/물/아세트산 용액으로 추출하여 HLB 카트리지로 정제한 후 액체크로마토그래프-질량분석기로 분석한다.

다. 장치

1) 액체크로마토그래프-질량분석기(LC-MS/MS)

라. 시약 및 시액

1) 용매: 잔류농약 시험용 또는 특급

2) 물: 3차 증류수 또는 이와 동등한 것

3) 표준원액: 티아페나실, 티아페나실 M36 및 티아페나실 M56 표준품을 각각 아세토니트릴에 녹여 1,000 mg/L가 되게 한다.

4) 표준용액: 표준원액을 무처리 시료 추출물을 이용하여 적당한 농도로 혼합, 희석한다(무처리 시료 추출물 90% 이상 포함).

5) HLB 카트리지(Hydrophilic Lipophilic Balance Cartridge): Divinylbenzene–N-vinylpyrrolidone Copolymer (500 mg) 고정상이 충전되어 있는 일회용 카트리지(용량 6 mL) 또는 이와 동등한 것

6) 기타시약: 잔류농약 시험용 또는 특급

마. 시험용액의 조제

1) 추출

검체 10 g (곡류 및 두류는 약 1 kg을 혼합하여 표준체 420 μm를 통과하도록 분쇄한 후 10 g, 서류, 과일류 및 채소류는 약 1 kg을 분쇄한 후 10 g)을 균질기 용기에 정확히 달아 넣고(곡류 및 두류의 경우 물 20 mL를 가한 후 30분간 방치) 아세토니트릴/물/아세트산(80/20/1, v/v/v) 용액 100 mL를 가하여 10분간 격렬하게 진탕한다. 추출물을 여과지(Whatman, No. 2)가 깔려있는 부흐너깔때기에 통과시켜 흡인여과하고 여액을 감압 플라스크에 받는다. 여과지 상의 추출 잔사를 다시 수거, 아세토니트릴/물/아세트산(80/20/1, v/v/v) 용액 50 mL를 가하여 재차 10분간 진탕한다. 추출물을 재차 흡인여과하고 아세토니트릴 20 mL로 잔사 및 용기를 씻어내려 앞서의 여과액과 합친 뒤 40℃ 이하 수용 상에서 감압 농축한다. 잔류물에 물 100 mL를 가하여 진탕, 혼합한 후 분액깔때기에 옮기고 포화식염수 50 mL를 가한 후 1 N 염산 1.0～1.5 mL를 추가하여 pH 1.5～1.8로 조절한다. 수용액에 에틸아세테이트 100 mL를 가하여 격렬하게 흔든 후 층이 완전히 분리될 때까지 정치하고, 에틸아세테이트 층을 무수황산나트륨에 통과시켜 농축 플라스크에 받는다. 수용액 층에 에틸아세테이트 100 mL를 추가로 가하여 위의 과정을 반복하고 합친 분배 추출액을 40℃ 이하의 수욕 상에서 감압 농축, 용매를 완전 증발시킨다. 잔류물에 1% 아세트산 함유 물 5 mL에 재용해 한다[지방성 검체의 경우 잔류물에 아세토니트릴로 포화시킨 헥산 30 mL에 재용해하여 분액깔때기에 옮기고 헥산으로 포화시킨 아세토니트릴 30 mL씩으로 2회 분배 추출한다. 합친 아세토니트릴 층을 40℃에서 감압 농축, 용매를 완전 증발시킨 후 잔류물에 1% 아세트산 함유 물 5 mL에 재용해한다.].

2) 정제

HLB 카트리지에 2～3방울/초의 속도로 메탄올 10 mL와 물 10 mL를 순차적으로 유출시켜 활성화한다. 고정상 상단이 노출되기 직전에  ‘1)추출’로부터 얻은 추출액 5 mL를 가하여 1～2 방울/초의 속도로 유출시켜 버리고 재차 메탄올/물(20/80, v/v) 5 mL를 가하여 유출시켜 버린다. 고정상 상단이 노출되기 직전에 메탄올 15 mL를 가하고 용출액을 증류 플라스크에 받은 후 40℃ 이하 수용 상에서 감압 농축하여 용매를 완전 증발시킨다. 잔류물을 아세토니트릴/물(50/50, v/v) 용액 5mL에 재용해한 후 멤브레인 필터(PTFE, 0.2 μm)로 여과하여 시험용액으로 사용한다.

바. 시험조작

1) 액체크로마토그래프 측정조건

가) 칼럼: C18 (Acquity UPLCⓇ BEH C18, 2.1 mm I.D. × 100 mm L., 1.7 μm) 또는 이와 동등한 것

나) 칼럼 온도: 40℃

다) 이동상

(1) 이동상 A: 0.1% 포름산 함유 아세토니트릴

(2) 이동상 B: 0.1% 포름산 함유 물

(3) 농도 구배 조건

시간(분)	A(%)	B(%)
0.0	5	95
3.0	5	95
4.0	100	0
6.0	100	0
8.0	5	95
10.0	5	95

라) 이동상 유속: 0.25 mL/분

마) 주입량: 10 μL

2) 질량분석기 측정조건

가) 이온화 방법: ESI positive-ion mode

나) Capillary voltage: 4.0 kV

다) Collision gas: 아르곤(Ar)

라) Cone voltage

(1) 티아페나실: 40 V

(2) 티아페나실 M36 및 티아페나실 M56: 16 V

표. 액체크로마토그래프-질량분석기 분석을 위한 특성이온

분석성분 (Compound)	평균분자량 (MW)	관측질량 (Exact mass)	선구이온 (Precursor ion, [M+H]+, m/z)	생성이온 (Product ion, m/z)	충돌에너지 (Collision energy, eV)
티아페나실 (Tiafenacil)	511.9	511.06	512	381	28
				480	26
티아페나실 M36 (Tiafenacil M36)	442.8	442.00	443	218	36
				369	20
티아페나실 M56 (Tiafenacil M56)	428.7	427.99	429	218	34
				355	20

※ 밑줄 표시 되어 있는 것은 정량이온이며, 그 외는 정성이온임.

※ 각 생성이온에 대한 질량분석기의 기기조건은 사용기기의 최적값으로 변경하여 사용할 수 있으며, 제시된 이외의 생성이온도 적용이 가능함.

3) 검량선 작성

표준용액을 농도별로 일정량 취하여 액체크로마토그래프- 질량분석기에 각각 주입하여 얻은 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적 값으로 검량선을 작성한다.

4) 표준품의 크로마토그램

A

B

C

그림. 액체크로마토그래프-질량분석기에서 표준품의 크로마토그램

A: 티아페나실(6.1분), B: 티아페나실 M36(5.9분), C: 티아페나실 M56(5.8분)

5) 정량한계

0.005 mg/kg

사. 정량시험

위 조건으로 얻은 크로마토그램상의 피크가 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치할 때 피크 높이 또는 면적을 검량선에 대입하여 정량한다.

아. 확인시험

액체크로마토그래프-질량분석기상의 머무름 시간과 특성이온으로 티아페나실, 티아페나실 M36 및 티아페나실 M56을 확인한다.

제7. 8.3.51을 다음과 같이 한다.

8.3.51 트리클로르폰(Trichlorfon, Metrifonate)

8.3.51.1 제1법

1) 시험법 적용범위
축산물 등에 적용한다.

2) 분석원리
검체 중의 트리클로르폰을 아세토니트릴로 추출하여 무수황산나트륨과 원심분리, 냉동으로 수분과 지방을 응결시켜 제거한 후 디클로로메탄으로 다시 추출하여 기체크로마토그래프/전자포획검출기(electron capture detector)로 분석한다. 트리클로르폰은 빛에 쉽게 분해되므로 실험과정에 사용되는 초자는 갈색유리병을 사용하거나 호일로 감싸 빛을 차단하여 실험한다.

3) 장치
기체크로마토그래프/전자포획검출기(electron capture detector)

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

나) 물 : 3차 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 표준원액 : 트리클로르폰 표준품을 정밀히 달아 아세톤에 녹여 100 μg/mL로 하고 냉장 보관한다.

라) 표준용액 : 표준원액을 에틸아세테이트로 희석하여 사용한다.

마) 기타시약 : 특급

5) 시험용액의 조제

가) 유(乳)
균질화 한 검체 10 g을 50 mL 원심 분리관에 취하고 아세토니트릴 30 mL와 염화나트륨 5 g을 가하여 2분간 균질화 한 후 20분간 진탕한다. 이 액을 4,500 G에서 15분간 원심 분리한 후 상층액 전량을 새로운 50 mL 원심 분리관에 옮기고 무수황산나트륨 5 g을 가하여 1분간 균질화 한다. 이를 다시 4,500 G에서 5분간 원심 분리한 후 -20℃에서 30분간 정치한다. 정치 후 상층액에서 12 mL를 취하여 250 mL 분액깔때기에 옮기고 포화 염화나트륨 용액 15 mL, 물 35 mL 및 디클로로메탄 30 mL를 가하여 5분간 진탕한다. 정치 후 하층(디클로로메탄 층)을 취하고 이전의 250 mL 분액깔때기에 디클로로메탄 20 mL를 가하여 5분간 진탕한다. 하층을 합하여 무수황산나트륨 층을 통과시켜 농축플라스크에 취하고 30℃ 이하에서 감압 농축한 후 잔류물을 에틸아세테이트 2 mL에 녹인다. 이 용액을 막 여과지(membrane filter)로 여과하여 시험용액으로 한다.

나) 유(乳)를 제외한 식품
4.3 축산물의 잔류농약 중 4.3.1.5 푸루실라졸(Flusilazole), 메카밤(Mecarbam), 메타크리포스(Methacrifos), 메타미도포스(Methamidophos), 모노크로토포스(Monocrotophos), 아세페이트(Acephate), 에디펜포스(Edifenfos), 이소펜포스(Isofenphos), 클로르피리포스메틸(Chlorpyifos-methyl), 터브포스(Terbufos), 트리클로폰(Trichlorfon), 펜치온(Fenthion), 펜토에이트(Phenthoate), 폭심(Phoxim) 및 포스메트(Phosmet) 시험법에 따른다.

6) 시험조작

가) 측정조건

(1) 칼럼 : Ultra-2 캐필러리 칼럼(50 m × 0.32 mm ID, 0.17 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 분석칼럼 : C18(2.1 × 150 mm, 5 μm) 또는 이와 동등한 것

(3) 운반기체(carrier gas) 및 유량 : 질소, 2.25 mL/분

(4) 오븐온도 : 100℃에서 검체를 주입하고 1분간 유지 후 5℃/분의 비율로 180℃까지 온도를 상승시켜 1분간 유지한다. 이를 다시 30℃/분의 비율로 290℃까지 온도를 상승시켜 5분간 유지한다.

(5) 주입부 : Split mode(5：1), 240℃

(6) 검출기온도 : 300℃

주1) 트리클로르폰이 디크로보스(Dichlorvos)로 전환되어 정량함

7) 정량시험
표준용액과 시험용액을 각각 기체크로마토그래프에 주입한다. 얻어진 각각의 피크 머무름 시간을 비교하여 피크의 높이 또는 면적으로 검량선을 작성하여 검체 중 트리클로르폰의 함량을 구한다.

8.3.51.2 제2법

1) 시험법 적용범위

수산물 등에 적용한다.

2) 분석원리

검체를 아세토니트릴로 추출하고 농축한 다음 아세토니트릴과 헥산 용액으로 액-액 분배하여 지방을 제거한 후 액체크로마토그래프/질량분석기로 분석한다.

3) 장치

액체크로마토그래프/질량분석기(LC-MS/MS)

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 액체크로마토그래프용 또는 이와 동등한 것

나) 물 : 3차 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 표준원액 : 100 mL 용량플라스크에 트리클로르폰 표준품을 정밀히 달아 메탄올에 녹여 100 mg/L가 되게 한다.

라) 표준용액 : 100 mL 용량플라스크에 각 표준원액을 메탄올로 희석하여 적당한 농도가 되게 한다.

마) 기타시약: 특급 또는 이와 동등한 것

5) 시험용액의 조제

가) 수산물

균질화한 검체 2 g을 50 mL 원심분리관에 취하고 아세토니트릴 20 mL를 가한 뒤 10분간 진탕 혼합한다. 4°C, 9,000 G에서 10분간 원심분리 후 상층액을 취한다. 상층액을 ㉠농축플라스크에 담아 40℃이하의 수욕상에서 감압농축한 후 잔류물을 아세토니트릴 포화 헥산 10 mL로 재용해하여 ㉡새로운 튜브에 옮긴다. 다시 ㉠농축플라스크에 헥산 포화 아세토니트릴 10 mL로 재용해한 다음 앞의 용액(㉡)과 합쳐 10분간 진탕 혼합한다. 혼합한 용액은 분리가 될 때까지 정치시킨 뒤 헥산층을 제거하고 40℃ 이하의 수욕상에서 감압농축 한다. 잔류물은 50% 메탄올 1 mL로 재용해하고 0.2 μm 막여과지(nylon membrane filter)로 여과하여 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 액체크로마토그래프 측정조건

(1) 칼럼: C18(Purospher® STAR RP-18, 2.1 ｘ 100 mm, 3 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상

(가) 이동상 A : 물

(나) 이동상 B : 메탄올

시간(분)	이동상 A(%)	이동상 B(%)
0	90	10
1	90	10
5	10	90
8	10	90
12	90	10
15	90	10

(3) 유속: 0.25 mL/분

(4) 칼럼온도: 40°C

(5) 주입량: 10 μL

나) 질량분석기 조건

(1) Ionization: ESI(Positive)

(2) Gas Temperature: 350°C

(3) Spray voltage : 5,000 V

(4) Collision gas: Ar(아르곤)

(5) 분석대상물질의 개별 조건

연번	물질명 (Compound)	머무름 시간(분)	분자량 (MW)	선구이온 (Precursor ion, m/z)	생성이온 (Product ion, m/z)	충돌에너지 (Collision Energy, eV)
1	트리클로르폰 (Trichlorfon)	5.4	257	257	79	28
					109	18
					221	15

※ 밑줄 표시 되어 있는 것은 정량이온이며 그 외 이온들은 정성이온임

※ 각 생성이온(Product ion)에 대한 질량분석기의 기기조건은 사용기기의 최적값으로 변경하여 사용할 수 있으며, 제시된 이외의 생성이온도 적용이 가능함

7) 정성시험

가) 정성

위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크는 표준용액 피크의 머무름 시간과 비교하여 일치하여야 한다. 또한 표준용액과 시험용액의 선구이온(Precursor ion) 및 생성이온(Product ion)이 일치하여야 하고, 표준용액과 시험용액의 생성이온간 반응세기의 비율(Response ratio)을 비교하여 그 비율은 주1)과 일치하여야 한다.

주1. 생성이온간 반응세기의 비율 허용범위

이온간 반응세기의 비율(%)	허용범위
> 50 %	≤ 20 %
> 20 %, ≤ 50 %	≤ 25 %
> 10 %, ≤ 20 %	≤ 30 %

나) 표준품 크로마토그램

트리클로르폰 (5.4분, 0.2 mg/L)

8) 정량시험

가) 정량

정성시험과 똑같은 조건에서 음성검체(blank sample)에 혼합표준용액을 일정농도로 제조한 후 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성하고, 시험용액의 크로마토그램으로부터 정량이온(quantitative ion)의 각 피크 높이 또는 피크 면적에 따라 각각 정량한다.

나) 정량한계

트리클로르폰(trichlorfon) : 0.005 mg/kg

제7. 8.3.113을 다음과 같이 한다.

8.3.113 아미트라즈(Amitraz)

1) 시험법 적용범위

축산물(벌꿀 제외) 등에 적용한다.

2) 분석원리

검체 중 분석대상물질을 아세토니트릴, 황산마그네슘, 염화나트륨, 시트르산나트륨, 시트르산수소나트륨 또는 헥산, 이소프로필알코올, 수산화나트륨으로 추출하여 C18으로 정제한 후 액체크로마토그래프/질량분석기로 분석한다.

3) 장치

액체크로마토그래프/질량분석기(LC-MS/MS)

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 액체크로마토그래프용 또는 이와 동등한 것

나) 물 : 3차 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 표준원액 : 100 mL 용량플라스크에 아미트라즈, 2,4-디메틸아닐린(2,4-Dimethylaniline, 아미트라즈대사체)표준품을 정밀히 달아 아세토니트릴에 녹여 100 mg/L가 되게 한다. 조제된 표준원액은 냉동 보관한다.

라) 혼합표준용액 : 100 mL 용량플라스크에 각 표준원액을 아세토니트릴로 희석하여 적당한 농도가 되게 한다.

마) 10 mM 개미산암모늄(ammonium formate) 용액: 1,000 mL 용량플라스크에 개미산암모늄 0.63 g을 넣고 물로 표시선까지 채운다.

바) 0.1% 개미산(formic acid) 함유 메탄올 용액: 1,000 mL 용량플라스크에 개미산 1 mL을 넣고 메탄올로 표시선까지 채운다.

사) 0.1 M 수산화나트륨용액 : 1,000 mL 용량플라스크에 수산화나트륨(NaOH) 4.04 g을 넣고 물로 녹여 표시선까지 채운다.

아) 기타시약: 특급 또는 이와 동등한 것

5) 시험용액의 조제

가) 가금육

균질화한 검체 5 g을 50 mL 원심분리관에 취하고 아세토니트릴 10 mL을 가한 후 1분간 진탕한다. 여기에 황산마그네슘 4 g, 염화나트륨 1 g, 시트르산나트륨 1 g, 시트르산수소나트륨 0.5 g을 가한 뒤 1분간 진탕하고 4℃에서 2,700 G로 10분간 원심분리한다. 새로운 15 mL 원심분리관에 상층액을 취하여 40°C 수용액상에서 질소농축한 후 아세토니트릴 1 mL를 가하여 재분산한다. 이를 5분간 초음파처리한 후, 4℃에서 13,500 G로 3분간 원심분리하여 상층액을 취하고 0.2 µm 막여과지(PTFE membrane filter)로 여과시킨 후 시험용액으로 한다.

나) 가금육을 제외한 식육

미리 균질화한 검체 2 g을 50 mL 원심분리관에 취한다. 여기에 균질화된 알(아미트라즈 및 2,4-디메틸아닐린이 검출되지 않은 알이어야 함) 2 mL, 0.1 M 수산화나트륨용액 2 mL, 헥산 4 mL, 이소프로필알코올 1.2 mL을 가한 뒤 1분간 진탕한 후 4℃에서 2,700 G로 5분간 원심분리하여 상층액 ⓐ를 취한다. 잔류물에 다시 0.1 M 수산화나트륨용액 2 mL, 헥산 4 mL, 이소프로필알코올 1.2 mL을 가한 뒤 1분간 진탕한 후 4℃에서 2,700 G로 5분간 원심분리하여 상층액 ⓑ를 취한다. 새로운 15 mL 원심분리관에 상층액 ⓐ와 ⓑ를 합한 후 40°C에서 질소농축하고, 잔류물을 아세토니트릴 0.5 mL로 재분산하여 1분간 진탕한다. 이를 5분간 초음파처리한 후, 4℃에서 13,500 G로 3분간 원심분리하여 상층액을 취하여 시험용액으로 한다.

다) 알

균질화한 검체 2 g을 15 mL 원심분리관에 취한다. 여기에 0.1 M 수산화나트륨용액 2 mL, 헥산 4 mL, 이소프로필알코올 1.2 mL을 가한 뒤 1분간 진탕한 후 4℃에서 2,700 G로 5분간 원심분리하여 상층액 ⓐ를 취한다. 잔류물에 다시 0.1 M 수산화나트륨용액 2 mL, 헥산 4 mL, 이소프로필알코올 1.2 mL을 가한 뒤 1분간 진탕한 후 4℃에서 2,700 G로 5분간 원심분리하여 상층액 ⓑ를 취한다. 새로운 50 mL 원심분리관에 상층액 ⓐ와 ⓑ를 합한 후 40°C 수용액상에서 질소농축한 후 아세토니트릴 1 mL를 가하여 재분산한다. 이를 5분간 초음파처리한 후, 4℃에서 13,500 G로 3분간 원심분리하여 상층액을 취하고 0.2 µm 막여과지(PTFE membrane filter)로 여과시킨 후 시험용액으로 한다.

라) 유

균질화한 검체 5 g을 50 mL 원심분리관에 취하고 아세토니트릴 10 mL을 가한 후 1분간 진탕한다. 여기에 황산마그네슘 4 g, 염화나트륨 1 g, 시트르산나트륨 1 g, 시트르산수소나트륨 0.5 g을 가한 뒤 1분간 진탕한 것을 4℃에서 2,700 G로 10분간 원심분리한다. 상층액을 취하여 150 mg PSA, 150 mg C18, 900 mg MgSO4를 담겨진 새로운 15 mL 원심분리관에 넣은 후 1분간 진탕하고, 4℃에서 2,700 G로 10분간 원심분리한다. 상층액을 취하여 40℃ 수용액상에서 질소농축한 후 아세토니트릴 1 mL를 가하여 재분산한다. 이를 5분간 초음파처리한 후, 4℃에서 13,500 G로 3분간 원심분리한다. 상층액을 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 액체크로마토그래프 측정조건

(1) 칼럼: C18 (Phenomenex Luna, 2.0 × 150 mm, 5 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상

(가) 이동상 A : 10 mM 개미산암모늄 용액

(나) 이동상 B : 0.1% 개미산 함유 메탄올 용액

시간(분)	이동상 A(%)	이동상 B(%)
0	90	10
3	0	100
9	0	100
10	90	10
15	90	10

(3) 유속: 0.25 mL/분

(4) 칼럼온도: 40℃

(5) 주입량: 10 μL

나) 질량분석기 조건

(1) Ionization: ESI (Positive)

(2) Gas Temperature: 350℃

(3) Collision gas: N2(질소)

(4) 분석대상물질의 개별 조건

연번	물질명 (Compound)	머무름 시간(분)	분자량 (MW)	선구이온 (Precursor ion, m/z)	생성이온 (Product ion, m/z)	충돌에너지 (Collision Energy, eV)
1	아미트라즈 (Amitraz)	9.2	293.41	294.13	163.20	19
					122.10	43
					107.10	59
2	2,4-디메틸아닐린 (2,4-Dimethylaniline)	6.7	121.18	122.06	107.10	23
					77.00	39
					105.10	23

※ 밑줄 표시 되어 있는 것은 정량이온이며 그 외 이온들은 정성이온임

※ 각 생성이온(Product ion)에 대한 질량분석기의 기기조건은 사용기기의 최적값으로 변경하여 사용할 수 있으며, 제시된 이외의 생성이온도 적용이 가능함

7) 정성시험

가) 정성

위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크는 표준용액 피크의 머무름 시간과 비교하여 일치하여야 한다. 또한 표준용액과 시험용액의 선구이온(Precursor ion) 및 생성이온(Product ion)이 일치하여야 하고, 표준용액과 시험용액의 생성이온간 반응세기의 비율(Response ratio)을 비교하여 그 비율은 주1)과 일치하여야 한다.

주1. 생성이온간 반응세기의 비율 허용범위

이온간 반응세기의 비율(%)	허용범위
> 50 %	≤ 20 %
> 20 %, ≤ 50 %	≤ 25 %
> 10 %, ≤ 20 %	≤ 30 %

나) 표준품 크로마토그램

아미트라즈(9.2분)

2,4-디메틸아닐린(6.7분)

그림 1. 아미트라즈, 2,4-디메틸아닐린 표준품의 크로마토그램 (각 0.005 mg/L)

8) 정량시험

가) 정량

정성시험과 똑같은 조건에서 음성검체에(blank sample)에 표준용액을 일정농도로 제조(matrix matched calibration standard)한 후 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성하고, 시험용액의 크로마토그램으로부터 정량이온(quantitative ion)의 각 피크 높이 또는 피크 면적에 따라 각각 정량한다.

나) 정량한계

아미트라즈(amitraz): 0.001 mg/kg(돼지 : 0.005 mg/kg)

2,4-디메틸아닐린(2,4-dimethylaniline): 0.005 mg/kg(돼지, 소 : 0.01 mg/kg)

제7. 8.3.118∼8.3.121을 다음과 같이 신설한다.

8.3.118 에마멕틴(Emamectin)

1) 시험법 적용범위

수산물 등에 적용한다.

2) 분석원리

검체 중 분석대상물질을 초산암모늄, EDTA(Ethylene Diamine Tetra Acetate, 아세토니트릴, 염화나트륨으로 추출하여 PSA(Primary Secondary Amine), C18, 황산마그네슘(MgSO4)로 정제한 후 액체크로마토그래프/질량분석기로 분석한다.

3) 장치

액체크로마토그래프/질량분석기(LC-MS/MS)

4) 시약 및 시액

가) 용매: 액체크로마토그래프용 또는 이와 동등한 것

나) 물: 3차 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 표준원액: 에마멕틴 B1a 표준품을 정밀히 달아 메탄올에 녹여 100 mg/L가 되게 한다. 조제된 표준원액은 냉동 보관한다.

라) 표준용액: 표준원액을 50% 메탄올로 희석하여 적당한 농도가 되게 한다.

마) 0.1% 개미산(Formic acid) : 1,000 mL 용량플라스크에 개미산 1 mL을 넣고 물로 표시선까지 채운다.

바) 0.1% 개미산을 함유한 메탄올 : 1,000 mL 용량플라스크에 개미산 1 mL을 넣고 메탄올로 표시선까지 채운다.

사) 추출용액 (50 mM ammonium acetate buffer(pH 4.1), 0.1 M EDTA): 500 mL 용량플라스크에 물을 적당히 넣은 뒤 초산암모늄 1,927 mg을 넣고 잘 섞어준다. 물로 표선을 맞추고 초산으로 pH를 조정한 후, EDTA 14.6 g을 넣고 충분히 녹을 때까지 초음파분쇄한다 (약 1시간, 상온에서 보관하며 상층액만 사용).

아) 기타시약 : 특급 또는 이와 동등한 것

5) 시험용액의 조제

균질화한 검체 5 g을 50 mL 원심분리관에 취하고, 추출용액 4 mL를 가한 후 1분간 진탕한다. 여기에 아세토니트릴 12 mL와 염화나트륨 2 g을 가한 뒤 10분간 진탕하고 4℃에서 2,700 G로 10분간 원심분리한다. 상층액을 37.5 mg PSA, 37.5 mg C18, 225 mg MgSO4가 담겨진 15 mL 원심분리관에 취하여 1분간 진탕하고 4℃에서 2,700 G로 10분간 원심분리한다. 상층액을 새로운 15 mL 원심분리관에 취하여 50°C에서 질소농축한 후 잔류물에 메탄올 0.5 mL와 0.1% 개미산 0.5 mL를 가하여 재분산하여 1분간 진탕하고 5분간 초음파처리한 후 4℃에서 13,500 G로 3분간 원심분리한다. 원심분리된 상층액을 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 액체크로마토그래프 측정조건

(1) 칼럼: Phenomenex Luna C18(2.0 × 150 mm, 5 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상 :

(가) 이동상 A : 0.1% 개미산

(나) 이동상 B : 0.1% 개미산을 함유한 메탄올

시간(분)	이동상 A(%)	이동상 B(%)
0	25	75
15	25	75

(3) 유속 : 0.25 mL/분

(4) 칼럼온도 : 40℃

(5) 주입량 : 3 μL

나) 질량분석기 조건

(1) Ionization : ESI (positive)

(2) Capillary temperature : 400℃

(3) Collision gas : N2 (질소)

(4) 분석대상물질의 개별 조건

물질명 (Compound)	머무름 시간(분)	분자량	선구이온 (Precusor ion, m/z)	생성이온 (Fragment ion, m/z)	충돌에너지 (Collision Energy, eV)
에마멕틴 B1a (Emamectin)	3.99	886.13	887	158.1	51
				81.9	103
				126.1	65

※ 밑줄 표시 되어 있는 것은 정량이온이며 그 외 이온은 정성이온임

※ 각 생성이온(Product ion)에 대한 질량분석기의 기기조건은 사용기기의 최적값으로 변경하여 사용할 수 있으며, 제시된 이외의 생성이온도 적용이 가능함

7) 정성시험

가) 정성

위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크는 표준용액 피크의 머무름 시간과 비교하여 일치하여야 한다. 또한 표준용액과 시험용액의 선구이온(precursor ion) 및 생성이온(product ion)이 일치하여야 하고, 표준용액과 시험용액의 생성이온간 반응세기의 비율(response ratio)을 비교하여 그 비율은 주1)과 일치하여야 한다.

주1). 생성이온간 반응세기의 비율 허용범위

이온간 반응세기의 비율(%)	허용범위
> 50 %	≤ 20 %
> 20 %, ≤ 50 %	≤ 25 %
> 10 %, ≤ 20 %	≤ 30 %

나) 표준품 크로마토그램

그림 1. 에마멕틴 표준품의 크로마토그램(0.005 mg/kg, 3.99분)

8) 정량시험

가) 정량

정성시험과 똑같은 조건에서 표준용액을 일정농도로 제조한 후 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성하고, 시험용액의 크로마토그램으로부터 정량이온(quantitative ion)의 각 피크 높이 또는 피크 면적에 따라 각각 정량한다.

나) 정량한계

에마멕틴(Emamaectin) : 0.005 mg/kg

8.3.119 디클로페낙(Diclofenac), 메토서페이트(Metoserpate), 부퀴놀레이트 (Buquinolate)

1) 시험법 적용범위

축산물 등에 적용한다.

2) 분석원리

검체 중의 분석대상물질을 개미산암모늄이 함유된 아세토니트릴로 추출하고 헥산으로 정제한 후 액체크로마토그래프/질량분석기로 분석한다.

3) 장치

액체크로마토그래프/질량분석기(LC-MS/MS)

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 액체크로마토그래프용 또는 이와 동등한 것

나) 물 : 3차 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 표준원액 : 100 mL 용량플라스크에 각 표준품을 정밀히 달아 메탄올에 녹여 100 mg/L가 되게 한다. 조제된 표준원액은 냉동 보관한다.

라) 혼합표준용액 : 100 mL 용량플라스크에 각 표준원액을 메탄올로 희석하여 적당한 농도가 되게 하여 사용한다.

마) 0.1% 아세트산(Acetic acid) 용액 : 1,000 mL 용량플라스크에 아세트산 1 mL을 넣고 물로 표시선까지 채운다.

바) 0.1% 개미산(Formic acid)을 함유한 아세토니트릴 : 1,000 mL 용량플라스크에 개미산 1 mL을 넣고 아세토니트릴로 표시선까지 채운다.

바) 기타시약 : 특급 또는 이와 동등한 것

5) 시험용액의 조제

균질화된 검체 2 g을 50 mL 원심분리관에 취하고 0.1% 개미산을 함유한 아세토니트릴을 10 mL을 가하여 10분간 진탕 혼합한 후 4℃에서 2,600 G로 15분간 원심 분리한다. 상층액을 50 mL 원심분리관에 취하여 헥산 10 mL을 넣고 10분간 진탕 혼합한 후 4℃에서 2,600 G로 15분간 원심분리한다. 하층액을 15 mL 원심분리관에 담아 40℃ 수용액상에서 0.3 mL가 될 때까지 질소농축한 후 0.1% 아세트산용액:메탄올(1:1, v/v) 혼합용액 1.7 mL을 가하여 재분산한다. 4℃에서 15,000 G로 10분간 원심분리 한 후 상층액을 0.45 μm 막 여과지(PTFE membrane filter)로 여과시킨 것을 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 액체크로마토그래프 측정조건

(1) 칼럼：C18(Phenomenex Luna 2.0 × 100 mm, 3.0 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상

(가) 이동상 A : 0.1% 아세트산 용액

(나) 이동상 B : 메탄올

시간(분)	이동상 A(%)	이동상 B(%)
0	90	10
3	90	10
5	10	90
13	10	90
15	90	10
20	90	10

(3) 유속 : 0.25 mL/분

(4) 칼럼온도 : 30℃

(5) 주입량 : 10 μL

나) 질량분석기 조건

(1) Ionization : ESI(positive, negative)

(2) Capillary Temperature : 350℃

(3) Collision gas : N2(질소)

(4) 분석대상물질의 개별 조건(MRM 조건)

연번	물질명 (Compound)	이온화 (Ionization mode)	머무름 시간(분)	분자량 (MW)	선구이온 (Precusor ion, m/z)	생성이온 (Product ion, m/z)	충돌에너지 (Collision Energy,eV)
1	디클로페낙 (Diclofenac)	Negative	12.58	296.1	293.7	250.0	-12
						214.0	-28
						178.0	-38
2	메토서페이트 (Metoserpate)	Positive	9.03	428.5	429.1	174.1	41
						131.1	89
						130.0	119
3	부퀴놀레이트 (Buquinolate)	Positive	12.19	361	362.1	204.0	49
						316.2	23
						148.1	65

※ 밑줄 표시 되어 있는 것은 정량이온이며 그 외 이온들은 정성이온임

※ 각 생성이온(Product ion)에 대한 질량분석기의 기기조건은 사용기기의 최적값으로 변경하여 사용할 수 있으며, 제시된 이외의 생성이온도 적용이 가능함

7) 정성시험

가) 정성

위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크는 표준용액 피크의 머무름 시간과 비교하여 일치하여야 한다. 또한 표준용액과 시험용액의 선구이온(precursor ion) 및 생성이온(product ion)이 일치하여야 하고, 표준용액과 시험용액의 생성이온간 반응세기의 비율(response ratio)을 비교하여 그 비율은 주1)과 일치하여야 한다.

주1).  생성이온간 반응세기의 비율 허용범위

이온간 반응세기의 비율(%)	허용범위
> 50 %	≤ 20 %
> 20 %, ≤ 50 %	≤ 25 %
> 10 %, ≤ 20 %	≤ 30 %

나) 표준품 크로마토그램

디클로페낙 (12.5분)

메토서페이트 (9.03분)

부퀴놀레이트 (12.19분)

그림 1. 디클로페낙, 메토서페이트, 부퀴놀레이트 표준품의 크로마토그램 (각 0.005 mg/L)

8) 정량시험

가) 정량

정성시험과 똑같은 조건에서 표준용액을 일정농도로 제조한 후 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성하고, 시험용액의 크로마토그램으로부터 정량이온(quantitative ion)의 각 피크 높이 또는 피크 면적에 따라 각각 정량한다.

나) 정량한계

디클로페낙(Diclofenac) : 0.002 mg/kg

메토서페이트(Metoserpate) : 0.001 mg/kg

부퀴놀레이트(Buquinolate) : 0.001 mg/kg

8.3.120 가미스로마이신(Gamithromycin), 설파니트란(Sulfanitran), 설파피리딘(Sulfapyridine)

1) 시험법 적용범위

축산물 등에 적용한다.

2) 분석원리

검체 중 분석대상물질을 아세토니트릴, 염화나트륨으로 추출하고 PSA(Primary Secondary Amine), C18, 황산마그네슘(MgSO4)로 정제한 후 액체크로마토그래프/질량분석기로 분석한다.

3) 장치

액체크로마토그래프/질량분석기(LC-MS/MS)

4) 시약 및 시액

가) 용매: 액체크로마토그래프용 또는 이와 동등한 것

나) 물: 3차 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 표준원액: 100 mL 용량플라스크에 각 표준품을 정밀히 달아 메탄올에 녹여 100 mg/L가 되게 한다. 조제된 표준원액은 냉동 보관한다.

라) 혼합 표준용액: 100 mL 용량플라스크에 각 표준원액을 50% 메탄올로 희석하여 적당한 농도가 되게 하여 사용한다.

마) 0.1% 개미산(Formic acid) 용액: 1,000 mL 용량플라스크에 개미산 1 mL를 넣고 물로 표시선까지 채운다.

바) 0.1% 개미산 함유 메탄올: 1,000 mL 용량플라스크에 개미산 1 mL을 넣고 메탄올로 표시선까지 채운다.

사) 기타시약: 특급 또는 이와 동등한 것

5) 시험용액의 조제

균질화한 검체 2 g을 15 mL 원심분리관에 취하고, 아세토니트릴 5 mL와 염화나트륨 1 g을 가한다. 이를 10분간 진탕 혼합한 후 4℃에서 2,700 G로 10분간 원심분리한다. 상층액을 25 mg PSA, 25 mg C18, 150 mg MgSO4가 담겨진 15 mL 원심분리관에 취하여 1분간 진탕하고 4℃에서 2,700 G로 10분간 원심분리한다. 상층액을 취하여 40°C에서 질소농축한 후 잔류물에 0.1% 개미산 함유 메탄올 0.5 mL와 0.1% 개미산 용액 0.5 mL로 재분산한다. 이를 5분간 초음파처리한 후 4℃에서 13,500 G로 3분간 원심분리한 후 상층액을 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 액체크로마토그래프 측정조건

(1) 칼럼: C18 (Phenomenex Luna 2.0 × 150 mm, 5 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상

(가) 이동상 A: 0.1% 개미산 용액

(나) 이동상 B: 0.1% 개미산 함유 메탄올

시간(분)	이동상 A(%)	이동상 B(%)
0	90	10
5	20	80
9	20	80
10	90	10
15	90	10

(3) 유속: 0.25 mL/분

(4) 칼럼온도: 40℃

(5) 주입량: 10 μL

나) 질량분석기 조건

(1) Ionization: ESI (Positive, Negative)

(2) Capillary Temperature: 350℃

(3) Collision gas: N2(질소)

(4) 분석대상물질의 개별 조건

연번	물질명 (Compound)	이온화 (Ionization mode	머무름 시간(분)	분자량 (MW)	선구이온 (Precursor ion, m/z)	생성이온 (Product ion, m/z)	충돌에너지 (Collision Energy, eV)
1	가미스로마이신 (Gamithromycin)	Positive	7.15	777.04	389.304	83.20	37
						72.00	71
						55.10	75
2	설파니트란 (Sulfanitran)	Negative	9.25	335.34	333.998	136.40	-44
						133.10	-36
						226.90	-42
3	설파피리딘 (Sulfapyridine)	Positive	6.05	249.29	250.112	92.10	39
						155.90	19
						64.80	57

※ 밑줄 표시 되어 있는 것은 정량이온이며 그 외 이온은 정성이온임

※ 각 생성이온(Product ion)에 대한 질량분석기의 기기조건은 사용기기의 최적값으로 변경하여 사용할 수 있으며, 제시된 이외의 생성이온도 적용이 가능함

7) 정성시험

가) 정성

위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크는 표준용액 피크의 머무름 시간과 비교하여 일치하여야 한다. 또한 표준용액과 시험용액의 선구이온(Precursor ion) 및 생성이온(Product ion)이 일치하여야 하고, 표준용액과 시험용액의 생성이온간 반응세기의 비율(Response ratio)을 비교하여 그 비율이 주1)과 일치하여야 한다.

주1. 생성이온간 반응세기의 비율 허용범위

이온간 반응세기의 비율(%)	허용범위
> 50%	≤ 20%
> 20%, ≤ 50%	≤ 25%
> 10%, ≤ 20%	≤ 30%

나) 표준품 크로마토그램

가미스로마이신(7.15분)

설파니트란(9.27분)

설파피리딘(6.06분)

그림 1. 가미스로마이신, 설파니트란, 설파피리딘 표준품의 크로마토그램 (각 0.005 mg/L)

8) 정량시험

가) 정량

정성시험과 똑같은 조건에서 표준용액을 일정농도로 제조한 후 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성하고, 시험용액의 크로마토그램으로부터 정량이온(quantitative ion)의 각 피크 높이 또는 피크 면적에 따라 각각 정량한다.

나) 정량한계

가미스로마이신: 0.005 mg/kg

설파니트란: 0.005 mg/kg

설파피리딘: 0.005 mg/kg

8.3.121 이소플루프레돈아세테이트(Isoflupredone acetate)

1) 시험법 적용범위

축·수산물 등에 적용한다.

2) 분석원리

검체 중의 분석대상물질을 0.1% 아세트산 함유 아세토니트릴로 추출하고 헥산으로 정제한 후 액체크로마토그래프/질량분석기로 분석한다.

3) 장치

액체크로마토그래프/질량분석기(LC-MS/MS)

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 액체크로마토그래프용 또는 이와 동등한 것

나) 물 : 3차 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 표준원액 : 100 mL 용량플라스크에 각 표준품을 정밀히 달아 메탄올에 녹여 100 mg/L가 되게 한다. 조제된 표준원액은 냉동 보관한다.

라) 혼합표준용액 : 100 mL 용량플라스크에 각 표준원액을 메탄올로 희석하여 적당한 농도가 되게 하여 사용한다.

마) 0.1% 아세트산(Acetic acid) 용액 : 1,000 mL 용량플라스크에 아세트산 1 mL를 넣고 물로 표시선까지 채운다.

바) 0.1% 아세트산 함유 메탄올 : 1,000 mL 용량 플라스크에 아세트산 1 mL를 넣고 메탄올로 표시선까지 채운다.

사) 기타시약 : 특급 또는 이와 동등한 것

5) 시험용액의 조제

균질화한 검체 5 g을 50 mL 원심분리관에 취하고 0.1% 아세트산 함유 아세토니트릴을 8 mL를 가한다. 이를 10분간 진탕 혼합한 후 4℃에서 2,600 G로서 15분간 원심 분리하여 상층액 ⓐ를 취한다. 잔류물에 다시 0.1% 아세트산 함유 아세토니트릴 7 mL를 가하여 10분간 진탕한 후 4℃에서 2,600 G로서 15분간 원심분리하여 상층액 ⓑ를 취한다. 새로운 50 mL 원심분리관에 상층액 ⓐ와 ⓑ를 합한 후 헥산 15 mL 넣고 10분간 진탕하고 4℃에서 2,600 G로 15분간 원심분리한다. 하층액을 취하여 40℃ 수용액상에서 0.3 mL가 될 때까지 질소농축 한 후 0.1% 아세트산 용액:0.1% 아세트산 함유 메탄올(1:1, v/v) 혼합용액 2.2 mL를 가하여 재분산한다. 4℃에서 15,000 G로 10분간 원심분리 한 후 상응액을 0.45 μm 막여과지(PTFE membrane filter)로 여과시킨 것을 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 액체크로마토그래프 측정조건

(1) 칼럼： C18 (Xbridge 2.1 × 100 mm, 3.5 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상

(가) 이동상 A : 0.1% 아세트산 용액

(나) 이동상 B : 0.1% 아세트산 함유 메탄올

시간(분)	이동상 A(%)	이동상 B(%)
0	95	5
3	95	5
5	5	95
13	5	95
15	95	5
20	95	5

(3) 유속 : 0.25 mL/분

(4) 칼럼온도 : 30℃

(5) 주입량 : 10 μL

나) 질량분석기 조건

(1) Ionization : ESI(Positive)

(2) Capillary Temperature : 350℃

(3) Collision gas : N2(질소)

(4) 분석대상물질의 개별 조건

물질명 (Compound)	머무름 시간(분)	분자량	선구이온 (Precursor ion, m/z)	생성이온 (Product ion, m/z)	충돌에너지 (Collision Energy, eV)
이소플루프레돈 아세테이트 (Isoflupredone acetate)	10.51	420.47	421.246	237.30	25
				341.30	17
				147.10	31

※ 밑줄 표시 되어 있는 것은 정량이온이며 그 외 이온들은 정성이온임

※ 각 생성이온(Product ion)에 대한 질량분석기의 기기조건은 사용기기의 최적값으로 변경하여 사용할 수 있으며, 제시된 이외의 생성이온도 적용이 가능함

7) 정성시험

가) 위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크는 표준용액 피크의 머무름 시간과 비교하여 일치하여야 한다. 또한 표준용액과 시험용액의 선구이온(Precursor ion) 및 생성이온(Product ion)이 일치하여야 하고, 표준용액과 시험용액의 생성이온간 반응세기의 비율(Response ratio)을 비교하여 그 비율이 주1)과 일치하여야 한다.

주1. 생성이온간 반응세기의 비율 허용범위

이온간 반응세기의 비율(%)	허용범위
> 50 %	± 20 %
> 20 %, ≤ 50 %	± 25 %
> 10 %, ≤ 20 %	± 30 %

나) 표준품 크로마토그램

이소플루프레돈아세테이트(10.51분)

그림 1. 이소플루프레돈아세테이트 표준품의 크로마토그램 (0.05 mg/L)

8) 정량시험

가) 정량

정성시험과 똑같은 조건에서 표준용액을 일정농도로 제조한 후 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성하고, 시험용액의 크로마토그램으로부터 정량이온(Quantitative ion)의 각 피크 높이 또는 피크 면적에 따라 각각 정량한다.

나) 정량한계

이소플루프레돈아세테이트(Isoflupredone acetate) : 0.002  mg/kg

[별표 3], (20) 다이쾃(Diquat) 중 다음 항목을 신설한다.

대두	0.3†

[별표 3], (55) 뷰프로페진(Buprofezin) 중 다음 항목을 신설한다.

레몬	2.5†

[별표 3], (69) 사이헥사틴(Cyhexatin) 중 다음 항목을 신설한다.

머위	15

[별표 3], (90) 엔도설판(Endosulfan) 중 다음 항목을 신설한다.

근채류	0.1T

[별표 3], (96) 옥사밀(Oxamyl) 중 “감자 0.1T”을 “감자 0.1†”로 한다.

[별표 3], (97) “옥시풀루오르펜(Oxyfluorfen)”을 “옥시플루오르펜(Oxyfluorfen)”으로 한다.

[별표 3], (101) 이미다클로프리드(Imidacloprid) 중 다음 항목을 신설한다.

망고스틴	0.4†

[별표 3], (111) 카바릴(Carbaryl∶NAC) 중 다음 항목을 신설한다.

두리안	30†

[별표 3], (116) 카탑(Cartap) 중 다음 항목을 신설한다.

엇갈이배추	2.0

[별표 3], (133) 테부코나졸(Tebuconazole) 중 “배추 0.05”를 “배추 0.2”로 하고, 다음 항목을 신설한다.

엇갈이배추	0.7

[별표 3], (135) 터부포스(Terbufos) 중 다음 항목을 신설한다.

엇갈이배추	0.05

[별표 3], (156) 파클로부트라졸(Paclobutrazol) 중 다음 항목을 신설한다.

배추	0.7

[별표 3], (173) 포레이트(Phorate) 중 다음 항목을 각각 신설한다.

배추	0.05

생강	0.05

엇갈이배추	0.05

[별표 3], (206) 클로르페나피르(Chlorfenapyr) 중 다음 항목을 신설한다.

망고	0.1

[별표 3], (210) 페나자퀸(Fenazaquin) 중 “감귤 0.7”을 “감귤 2.0”으로 한다.

[별표 3], (234) 펜피록시메이트(Fenpyroximate) 중 “감귤 0.5”를 삭제하고, 다음 항목을 신설한다.

감귤류	0.5†

[별표 3], (238) 플루디옥소닐(Fludioxonil) 중 “감자 0.02”를 “감자 5.0†”으로 하고, 다음 항목을 신설한다.

풋마늘	0.05

[별표 3], (246) 스피노사드(Spinosad) 중 다음 항목을 각각 신설한다.

망고	0.1

아몬드	0.07†

오렌지	0.3†

[별표 3], (248) 아바멕틴(Abamectin) 중 다음 항목을 신설한다.

레몬	0.02†

[별표 3], (249) 에마멕틴 벤조에이트(Emamectin benzoate) 중 다음 항목을 신설한다.

망고	0.05

[별표 3], (259) 피리메타닐(Pyrimethanil) 중 다음 항목을 신설한다.

엇갈이배추	0.1

[별표 3], (290) 인독사카브(Indoxacarb) 중 “체리 0.3”을 “체리 0.9†”로 하고, 다음 항목을 각각 신설한다.

멜론	0.5†

크랜베리	1.0†

토마토	0.3†

[별표 3], (292) 퀸클로락(Quinclorac) 중 다음 항목을 신설한다.

크랜베리	1.5†

[별표 3], (309) 플루톨라닐(Flutolanil) 중 다음 항목을 신설한다.

감자	0.15†

[별표 3], (323) 보스칼리드(Boscalid) 중 “수박 0.3”을 “수박 0.7”로 한다.

[별표 3], (332) 클로티아니딘(Clothianidin) 중 다음 항목을 신설한다.

두리안	0.9†

[별표 3], (352) 메톡시페노자이드(Methoxyfenozide) 중 다음 항목을 신설한다.

아보카도	0.7†

[별표 3], (357) 디티오카바메이트(Dithiocarbamates) 중 다음 항목을 신설한다.

용안	15†

[별표 3], (370) 벤티아발리카브아이소프로필(Benthiavalicarb-isopropyl) 중 “오이 0.07”을 “오이 0.3”으로 한다.

[별표 3], (403) 메타플루미존(Metaflumizone) 중 다음 항목을 신설한다.

자두	0.1

[별표 3], (404) 메트라페논(Metrafenone) 중 다음 항목을 각각 신설한다.

건삼	0.3

수삼	0.1

[별표 3], (408) 스피네토람(Spinetoram) 중 다음 항목을 신설한다.

망고	0.05

[별표 3], (421) 레피멕틴(Lepimectin) 중 다음 항목을 신설한다.

배추	0.05

[별표 3], (433) 사이안트라닐리프롤(Cyantraniliprole) 중 “복숭아 0.3”을 “복숭아 1.5†”로 한다.

[별표 3], (435) 펜피라자민(Fenpyrazamine) 중 다음 항목을 신설한다.

가지	1.0

[별표 3], (437) 플룩사피록사드(Fluxapyroxad) 중 다음 항목을 신설한다.

엇갈이배추	0.05

[별표 3], (441) 피리벤카브(Pyribencarb) 중 “고추 0.05”를 “고추 2.0”으로 하고, “피망 0.05”를 “피망 2.0”으로 한다.

[별표 3], (442) 플루피라디퓨론(Flupyradifurone) 중 “브로콜리”를 “브로콜리(콜리플라워 포함)”으로 한다.

[별표 3], (459) 피플루뷰마이드(Pyflubumide) 중 다음 항목을 각각 신설한다.

고추	1.0

오이	0.3

참외	0.2

[별표 3], (460) 피카뷰트라족스(Picarbutrazox) 중 다음 항목을 각각 신설한다.

참외	0.5

토마토	2.0

[별표 3], (461) 벤조빈디플루피르(Benzovindiflupyr) 중 다음 항목을 각각 신설한다.

두류	0.2†

유채씨	0.15†

인과류	0.2†

커피원두	0.15†

포도	1.0†

[별표 3], (465) 톨펜피라드(Tolfenpyrad) 중 다음 항목을 신설한다.

체리	2.0†

[별표 3], (467)∼(469)을 다음과 같이 신설한다.

(467) 플룩사메타마이드(Fluxametamide)

◎ 잔류물의 정의 : Fluxametamide

고추	1.0

배추	2.0

복숭아	2.0

사과	0.5

수박	0.05

엇갈이배추	5.0

오이	0.3

참외	0.3

토마토	0.5

파	3.0

피망	1.0

(468) 티아페나실(Tiafenacil)

◎ 잔류물의 정의 : Tiafenacil, tiafenacil M36 및 tiafenacil M56의 합을 tiafenacil로 함

감	0.05

감귤	0.05

밤	0.05

복숭아	0.05

사과	0.05

포도	0.05

(469) 플루트리아폴(Flutriafol)

◎ 잔류물의 정의 : Flutriafol

바나나	0.3†

[별표 5], (4) 노보비오신(Novobiocin) 중 다음 항목을 신설한다.

유	0.01

[별표 5], (68) 델타메트린(Deltamethrin) 중 “닭근육 0.03”을 “가금근육 0.03”으로 하고, “닭간 0.05”를 “가금간 0.05”로 하며, “닭지방 0.5”를 “가금지방 0.5”로 하고, “닭신장 0.05”를 “가금신장 0.05”로 하며, 다음 항목을 신설한다.

돼지근육	0.01

[별표 5], (75) 트리클로르폰(Trichlorfon) 중 다음 항목을 각각 신설한다.

염소근육	0.05

염소간	0.05

염소지방	0.05

염소신장	0.05

말근육	0.05

말간	0.05

말지방	0.05

말신장	0.05

가금근육	0.01

알	0.01

어류	0.01

[별표 5], (121) 사이퍼메트린(Cypermethrin) 중 다음 항목을 각각 신설한다.

돼지근육	0.05

돼지간	0.05

돼지지방	0.2

돼지신장	0.05

말근육	0.05

말간	0.05

말지방	0.2

말신장	0.05

토끼근육	0.05

토끼간	0.05

토끼지방	0.2

토끼신장	0.05

가금근육	0.05

알	0.05

[별표 5], (192) 프로폭서(Propoxur) 중 “닭근육 0.01”을 “가금근육 0.01”로 하고, 다음 항목을 신설한다.

양근육	0.05

염소근육	0.05

부칙

제1조(시행일) ① 이 고시는 고시한 날부터 시행한다.

② 제1조제1항에도 불구하고 [별표 5]의 개정규정은 2018년 5월 21일부터 시행한다.

제2조(적용례) 이 고시는 이 고시 시행 이후 최초로 제조·가공 또는 수입한 식품(선적일 기준)부터 적용한다.

제3조(경과조치) 이 고시는 이 고시 시행 당시 제조․가공․판매 또는 수입되어 검사가 진행 중인 사항에 대하여는 종전의 규정에 따른다.

현  행

개  정(안)

제1. ∼ 제6. (생   략)

제7. 일반시험법

7. 식품 중 잔류농약 분석법

7.1 ∼ 7.1.4.210 (생   략)

제1. ∼ 제6. (현행과 같음)

제7. 일반시험법

7. 식품 중 잔류농약 분석법

7.1 ∼ 7.1.4.210 (현행과 같음)

<신    설>

7.1.4.211 플룩사메타마이드(Fluxametamide)

가. 시험법 적용범위

곡류, 서류, 두류, 과일류, 채소류 등의 식품에 적용한다.

나. 분석원리

검체 중 플룩사메타마이드를 아세토니트릴로 추출한 후 실리카 카트리지로 정제하여 액체크로마토그래프-질량분석기로 분석한다.

다. 장치

1) 액체크로마토그래프-질량분석기(LC-MS/MS)

라. 시약 및 시액

1) 용매: 잔류농약 시험용 또는 특급

2) 물: 3차 증류수 또는 이와 동등한 것

3) 표준원액: 플룩사메타마이드 표준품을 아세토니트릴에 녹여 1,000 mg/L가 되게 한다.

4) 표준용액: 표준원액을 무처리 시료 추출물을 이용하여 적당한 농도로 혼합, 희석한다(무처리 시료추출물 90% 이상 포함).

5) 실리카 카트리지: 고정상이 충전되어 있는 일회용 카트리지(용량 6 mL) 또는 이와 동등한 것

6) 기타시약: 잔류농약 시험용 또는 특급

마. 시험용액의 조제

1) 추출

검체를 분쇄하여 균질화 한 후 10 g (곡류 및 두류는 약 1 kg을 혼합하여 표준체 420 μm를 통과하도록 분쇄한 후 10 g, 서류, 과일류, 채소류는 약 1 kg을 분쇄한 후 10 g)을 정밀히 달고(곡류 및 두류의 경우 물 20 mL를 가한 후 30분간 방치) 아세토니트릴 50 mL를 가하여 진탕기에서 10분간 격렬하게 진탕한다. 추출물은 여과지(Whatman, No. 2)가 깔려있는 부흐너깔때기에 통과시켜 흡인 여과, 여과액을 감압플라스크에 받는다. 아세토니트릴 20 mL로 잔사 및 용기를 씻어내려 앞서의 여과액과 합친 뒤 40℃ 이하 수욕 상에서 감압농축한다. 잔류물에 물 100 mL를 가하여 진탕, 혼합한 후 분액깔때기에 옮기고 염화나트륨 10 g을 가한 후 디클로로메탄 30 mL를 가하여 격렬하게 흔든 후 층이 완전히 분리될 때까지 정치하고, 디클로로메탄 층을 무수황산나트륨에 통과시켜 농축플라스크에 받는다. 수용액 층에 디클로로메탄 30 mL를 추가로 가하여 위의 과정을 반복하고 합친 분배 추출액을 40℃ 이하의 수욕 상에서 감압 농축, 용매를 완전 증발시킨다. 잔류물을 디클로로메탄 10 mL에 재용해한다[지방성 검체의 경우 잔류물을 아세토니트릴로 포화시킨 헥산 30 mL에 재용해하여 분액깔때기에 옮기고 헥산으로 포화시킨 아세토니트릴 30 mL씩으로 2회 분배 추출한다. 합친 아세토니트릴 층을 40℃에서 감압 농축, 용매를 완전 증발시킨 후 잔류물을 디클로로메탄 10 mL에 재용해한다.].

2) 정제

실리카 카트리지에 2～3 방울/초의 속도로 디클로로메탄 10 mL를 유출시켜 활성화한다. 고정상 상단이 노출되기 직전에 ‘1) 추출’로부터 얻은 추출액 5 mL를 가하여 1～2 방울/초의 속도로 유출시켜 버린다. 고정상 상단이 노출되기 직전에 아세톤/디클로로메탄용액(5/95, v/v) 용액 10 mL를 가하고 용출액을 증류플라스크에 받은 후 40℃ 이하 수욕 상에서 감압 농축, 용매를 완전 증발시킨다. 잔류물을 아세토니트릴 5 mL에 재용해한 후 멤브레인 필터(PTFE, 0.2 μm)로 여과하여 시험용액으로 사용한다.

바. 시험조작

1) 액체크로마토그래프 분석조건

가) 칼럼: C18 (Unison UK-C18, 2.1 mm I.D. × 100 mm L., 3.5 μm) 또는 이와 동등한 것

나) 칼럼 온도: 40℃

다) 이동상

(1) 이동상 A: 0.1% 포름산 함유 아세토니트릴

(2) 이동상 B: 0.1% 포름산 함유 물

(3) 농도 구배 조건

시간(분)	A(%)	B(%)
0.0	80	20
1.0	80	20
4.0	20	80
6.0	20	80
8.0	80	20
10.0	80	20

라) 이동상 유속: 0.2 mL/분

마) 주입량: 1 μL

2) 질량분석기 측정조건

가) 이온화 방법: ESI positive-ion mode

나) Capillary voltage:  3.0 kV

다) Collision gas: 아르곤 (Ar)

라) Cone voltage:  40 V

표. 액체크로마토그래프-질량분석기 분석을 위한 특성이온

분석성분 (Compound)	평균 분자량 (MW)	관측질량 (Exact mass)	선구이온 (Precursor ion, [M+H]+, m/z)	생성이온 (Product ion, m/z)	충돌에너지 (Collision energy, eV)
플룩사메타마이드 (Fluxametamide)	474.3	473.05	474	400	23
				160	38

※ 밑줄 표시 되어 있는 것은 정량이온이며, 그 외는 정성이온임.

※ 각 생성이온에 대한 질량분석기의 기기조건은 사용기기의 최적값으로 변경하여 사용할 수 있으며, 제시된 이외의 생성이온도 적용이 가능함.

3) 검량선 작성

표준용액을 농도별로 일정량 취하여 액체크로마토그래프-질량분석기에 각각 주입하여 얻은 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적 값으로 검량선을 작성한다.

4) 표준품의 크로마토그램

그림. 액체크로마토그래프-질량분석기에서 표준품의 크로마토그램 플룩사메타마이드(6.7분)

5) 정량한계

0.005 mg/kg

사. 정량시험

위 조건으로 얻은 크로마토그램상의 피크가 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치할 때 피크 높이 또는 면적을 검량선에 대입하여 정량한다.

아. 확인시험

액체크로마토그래프-질량분석기상의 머무름 시간과 특성이온으로 플룩사메타마이드를 확인한다.

<신    설>

7.1.4.212 티아페나실(Tiafenacil)

가. 시험법 적용범위

곡류, 서류, 두류, 과일류, 채소류 등의 식품에 적용한다.

나. 분석원리

검체 중 모화합물인 티아페나실과 대사산물 티아페나실 M36 [2-(2-chloro- 4-fluoro-5-(3-methyl-2,6-dioxo-4-(trifluoromethyl)-2,3-dihydropyrimidin-1(6H)-yl)phenyl)sulfinyl)propanoic acid] 및 티아페나실 M56 [2-(2-chloro–5- (2,6-dioxo-4-(trifluoromethyl)-2,3-dihydropyrimidin-1(6H)-yl)-4-fluorophenyl)sulfinyl)propanoic acid]을 아세토니트릴/물/아세트산 용액으로 추출하여 HLB 카트리지로 정제한 후 액체크로마토그래프-질량분석기로 분석한다.

다. 장치

1) 액체크로마토그래프-질량분석기(LC-MS/MS)

라. 시약 및 시액

1) 용매: 잔류농약 시험용 또는 특급

2) 물: 3차 증류수 또는 이와 동등한 것

3) 표준원액: 티아페나실, 티아페나실 M36 및 티아페나실 M56 표준품을 각각 아세토니트릴에 녹여 1,000 mg/L가 되게 한다.

4) 표준용액: 표준원액을 무처리 시료 추출물을 이용하여 적당한 농도로 혼합, 희석한다(무처리 시료 추출물 90% 이상 포함).

5) HLB 카트리지(Hydrophilic Lipophilic Balance Cartridge): Divinylbenzene–N-vinylpyrrolidone Copolymer (500 mg) 고정상이 충전되어 있는 일회용 카트리지(용량 6 mL) 또는 이와 동등한 것

6) 기타시약: 잔류농약 시험용 또는 특급

마. 시험용액의 조제

1) 추출

검체 10 g (곡류 및 두류는 약 1 kg을 혼합하여 표준체 420 μm를 통과하도록 분쇄한 후 10 g, 서류, 과일류 및 채소류는 약 1 kg을 분쇄한 후 10 g)을 균질기 용기에 정확히 달아 넣고(곡류 및 두류의 경우 물 20 mL를 가한 후 30분간 방치) 아세토니트릴/물/아세트산(80/20/1, v/v/v) 용액 100 mL를 가하여 10분간 격렬하게 진탕한다. 추출물을 여과지(Whatman, No. 2)가 깔려있는 부흐너깔때기에 통과시켜 흡인여과하고 여액을 감압 플라스크에 받는다. 여과지 상의 추출 잔사를 다시 수거, 아세토니트릴/물/아세트산(80/20/1, v/v/v) 용액 50 mL를 가하여 재차 10분간 진탕한다. 추출물을 재차 흡인여과하고 아세토니트릴 20 mL로 잔사 및 용기를 씻어내려 앞서의 여과액과 합친 뒤 40℃ 이하 수용 상에서 감압 농축한다. 잔류물에 물 100 mL를 가하여 진탕, 혼합한 후 분액깔때기에 옮기고 포화식염수 50 mL를 가한 후 1 N 염산 1.0～1.5 mL를 추가하여 pH 1.5～1.8로 조절한다. 수용액에 에틸아세테이트 100 mL를 가하여 격렬하게 흔든 후 층이 완전히 분리될 때까지 정치하고, 에틸아세테이트 층을 무수황산나트륨에 통과시켜 농축 플라스크에 받는다. 수용액 층에 에틸아세테이트 100 mL를 추가로 가하여 위의 과정을 반복하고 합친 분배 추출액을 40℃ 이하의 수욕 상에서 감압 농축, 용매를 완전 증발시킨다. 잔류물에 1% 아세트산 함유 물 5 mL에 재용해 한다[지방성 검체의 경우 잔류물에 아세토니트릴로 포화시킨 헥산 30 mL에 재용해하여 분액깔때기에 옮기고 헥산으로 포화시킨 아세토니트릴 30 mL씩으로 2회 분배 추출한다. 합친 아세토니트릴 층을 40℃에서 감압 농축, 용매를 완전 증발시킨 후 잔류물에 1% 아세트산 함유 물 5 mL에 재용해한다.].

2) 정제

HLB 카트리지에 2～3방울/초의 속도로 메탄올 10 mL와 물 10 mL를 순차적으로 유출시켜 활성화한다. 고정상 상단이 노출되기 직전에  ‘1) 추출’로부터 얻은 추출액 5 mL를 가하여 1-2 방울/초의 속도로 유출시켜 버리고 재차 메탄올/물(20/80, v/v) 5 mL를 가하여 유출시켜 버린다. 고정상 상단이 노출되기 직전에 메탄올 15 mL를 가하고 용출액을 증류 플라스크에 받은 후 40℃ 이하 수용 상에서 감압 농축하여 용매를 완전 증발시킨다. 잔류물을 아세토니트릴/물(50/50, v/v) 용액 5mL에 재용해한 후 멤브레인 필터(PTFE, 0.2 μm)로 여과하여 시험용액으로 사용한다.

바. 시험조작

1) 액체크로마토그래프 측정조건

가) 칼럼: C18 (Acquity UPLCⓇ BEH C18, 2.1 mm I.D. × 100 mm L., 1.7 μm) 또는 이와 동등한 것

나) 칼럼 온도: 40℃

다) 이동상

(1) 이동상 A: 0.1% 포름산 함유 아세토니트릴

(2) 이동상 B: 0.1% 포름산 함유 물

(3) 농도 구배 조건

시간(분)	A(%)	B(%)
0.0	5	95
3.0	5	95
4.0	100	0
6.0	100	0
8.0	5	95
10.0	5	95

라) 이동상 유속: 0.25 mL/분

마) 주입량: 10 μL

2) 질량분석기 측정조건

가) 이온화 방법: ESI positive-ion mode

나) Capillary voltage:  4.0 kV

다) Collision gas: 아르곤(Ar)

라) Cone voltage

(1) 티아페나실: 40 V

(2) 티아페나실 M36 및 티아페나실 M56: 16 V

표. 액체크로마토그래프-질량분석기 분석을 위한 특성이온

분석성분 (Compound)	평균 분자량 (MW)	관측질량 (Exact mass)	선구이온 (Precursor ion, [M+H]+, m/z)	생성이온 (Product ion, m/z)	충돌에너지 (Collision energy, eV)
티아페나실 (Tiafenacil)	511.9	511.06	512	381	28
				480	26
티아페나실 M36 (Tiafenacil M36)	442.8	442.00	443	218	36
				369	20
티아페나실 M56 (Tiafenacil M56)	428.7	427.99	429	218	34
				355	20

※ 밑줄 표시 되어 있는 것은 정량이온이며, 그 외는 정성이온임.

※ 각 생성이온에 대한 질량분석기의 기기조건은 사용기기의 최적값으로 변경하여 사용할 수 있으며, 제시된 이외의 생성이온도 적용이 가능함.

3) 검량선 작성

표준용액을 농도별로 일정량 취하여 액체크로마토그래프-질량분석기에 각각 주입하여 얻은 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적 값으로 검량선을 작성한다.

4) 표준품의 크로마토그램

A

B

C

그림. 액체크로마토그래프-질량분석기에서 표준품의 크로마토그램

A: 티아페나실(6.1분),

B: 티아페나실 M36(5.9분),

C: 티아페나실 M56(5.8분)

5) 정량한계

0.005 mg/kg

사. 정량시험

위 조건으로 얻은 크로마토그램상의 피크가 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치할 때 피크 높이 또는 면적을 검량선에 대입하여 정량한다.

아. 확인시험

액체크로마토그래프-질량분석기상의 머무름 시간과 특성이온으로 티아페나실, 티아페나실 M36 및 티아페나실 M56을 확인한다.

7.2 ∼ 8.3.50 (생   략)

7.2 ∼ 8.3.50 (현행과 같음)

8.3.51 트리클로르폰(Trichlorfon, Metrifonate)

<신  설>

1) ∼ 7) (생   략)

<신  설>

8.3.51 트리클로르폰(Trichlorfon, Metrifonate)

8.3.51.1 제1법

1) ∼ 7) (현행과 같음)

8.3.51.2 제2법

1) 시험법 적용범위

수산물 등에 적용한다.

2) 분석원리

검체를 아세토니트릴로 추출하고 농축한 다음 아세토니트릴과 헥산 용액으로 액-액 분배하여 지방을 제거한 후 액체크로마토그래프/질량분석기로 분석한다.

3) 장치

액체크로마토그래프/질량분석기(LC-MS/MS)

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 액체크로마토그래프용 또는 이와 동등한 것

나) 물 : 3차 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 표준원액 : 100 mL 용량플라스크에 트리클로르폰 표준품을 정밀히 달아 메탄올에 녹여 100 mg/L가 되게 한다.

라) 표준용액 : 100 mL 용량플라스크에 각 표준원액을 메탄올로 희석하여 적당한 농도가 되게 한다.

마) 기타시약: 특급 또는 이와 동등한 것

5) 시험용액의 조제

가) 수산물

균질화한 검체 2 g을 50 mL 원심분리관에 취하고 아세토니트릴 20 mL를 가한 뒤 10분간 진탕 혼합한다. 4°C, 9,000 G에서 10분간 원심분리 후 상층액을 취한다. 상층액을 ㉠농축플라스크에 담아 40℃이하의 수욕상에서 감압농축한 후 잔류물을 아세토니트릴 포화 헥산 10 mL로 재용해하여 ㉡새로운 튜브에 옮긴다. 다시 ㉠농축플라스크에 헥산 포화 아세토니트릴 10 mL로 재용해한 다음 앞의 용액(㉡)과 합쳐 10분간 진탕 혼합한다. 혼합한 용액은 분리가 될 때까지 정치시킨 뒤 헥산층을 제거하고 40℃이하의 수욕상에서 감압농축 한다. 잔류물은 50% 메탄올 1 mL로 재용해하고 0.2 μm 막여과지(nylon membrane filter)로 여과하여 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 액체크로마토그래프 측정조건

(1) 칼럼: C18(Purospher® STAR RP-18, 2.1 ｘ 100 mm, 3 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상

(가) 이동상 A : 물

(나) 이동상 B : 메탄올

시간(분)	이동상 A(%)	이동상 B(%)
0	90	10
1	90	10
5	10	90
8	10	90
12	90	10
15	90	10

(3) 유속: 0.25 mL/분

(4) 칼럼온도: 40°C

(5) 주입량: 10 μL

나) 질량분석기 조건

(1) Ionization: ESI(Positive)

(2) Gas Temperature: 350°C

(3) Spray voltage : 5,000 V

(4) Collision gas: Ar (아르곤)

(5) 분석대상물질의 개별 조건

연번	물질명 (Compound)	머무름 시간 (분)	분자량 (MW)	선구 이온 (Precursor ion, m/z)	생성 이온 (Product ion, m/z)	충돌 에너지 (Collision Energy, eV)
1	트리 클로르폰 (Trichlor fon)	5.4	257	257	79	28
					109	18
					221	15

※ 밑줄 표시 되어 있는 것은 정량이온이며 그 외 이온들은 정성이온임

※ 각 생성이온(Product ion)에 대한 질량분석기의 기기조건은 사용기기의 최적값으로 변경하여 사용할 수 있으며, 제시된 이외의 생성이온도 적용이 가능함

7) 정성시험

가) 정성

위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크는 표준용액 피크의 머무름 시간과 비교하여 일치하여야 한다. 또한 표준용액과 시험용액의 선구이온(Precursor ion) 및 생성이온(Product ion)이 일치하여야 하고, 표준용액과 시험용액의 생성이온간 반응세기의 비율(Response ratio)을 비교하여 그 비율은 주1)과 일치하여야 한다.

주1. 생성이온간 반응세기의 비율 허용범위

이온간 반응세기의 비율(%)	허용범위
> 50 %	≤ 20 %
> 20 %, ≤ 50 %	≤ 25 %
> 10 %, ≤ 20 %	≤ 30 %

나) 표준품 크로마토그램

트리클로르폰 (5.4분, 0.2 mg/L)

8) 정량시험

가) 정량

정성시험과 똑같은 조건에서 음성검체에(blank sample)에 혼합표준용액을 일정농도로 제조한 후 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성하고, 시험용액의 크로마토그램으로부터 정량이온(quantitative ion)의 각 피크 높이 또는 피크 면적에 따라 각각 정량한다.

나) 정량한계

트리클로르폰(trichlorfon) : 0.005 mg/kg

8.3.52 ∼ 8.3.112 (생   략)

8.3.52 ∼ 8.3.112 (현행과 같음)

8.3.113 아미트라즈(Amitraz)

1) 시험법 적용범위

축산물 등에 적용한다.

2) ∼ 4) (생   략)

5) 시험용액의 조제

가) (생   략)

<신  설>

나) (생   략)

다) 우유

(생   략)

6) ∼ 7) (생   략)

8) 정량시험

가) 정량

정성시험과 똑같은 조건에서 표준용액을 일정농도로 제조한 후 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성하고, 시험용액의 크로마토그램으로부터 정량이온(Quantitative ion)의 각 피크 높이 또는 피크 면적에 따라 각각 정량한다.

나) 정량한계

아미트라즈(Amitraz): 0.001 mg/kg

2,4-디메틸아닐린(2,4-Dimethylaniline): 0.005 mg/kg

8.3.113 아미트라즈(Amitraz)

1) 시험법 적용범위

축산물(벌꿀 제외) 등에 적용한다.

2) ∼ 4) (현행과 같음)

5) 시험용액의 조제

가) (현행과 같음)

나) 가금육을 제외한 식육

미리 균질화한 검체 2 g을 50 mL 원심분리관에 취한다. 여기에 균질화된 알(아미트라즈 및 2,4-디메틸아닐린이 검출되지 않은 알이어야 함) 2 mL, 0.1 M 수산화나트륨용액 2 mL, 헥산 4 mL, 이소프로필알코올 1.2 mL을 가한 뒤 1분간 진탕한 후 4℃에서 2,700 G로 5분간 원심분리하여 상층액 ⓐ를 취한다. 잔류물에 다시 0.1 M 수산화나트륨용액 2 mL, 헥산 4 mL, 이소프로필알코올 1.2 mL을 가한 뒤 1분간 진탕한 후 4℃에서 2,700 G로 5분간 원심분리하여 상층액 ⓑ를 취한다. 새로운 15 mL 원심분리관에 상층액 ⓐ와 ⓑ를 합한 후 40°C에서 질소농축하고, 잔류물을 아세토니트릴 0.5 mL로 재분산하여 1분간 진탕한다. 이를 5분간 초음파처리한 후, 4℃에서 13,500 G로 3분간 원심분리하여 상층액을 취하여 시험용액으로 한다.

다) (현행과 같음)

라) 유

(현행과 같음)

6) ∼ 7) (현행과 같음)

8) 정량시험

가) 정량

정성시험과 똑같은 조건에서 음성검체에(blank sample)에 표준용액을 일정농도로 제조(matrix matched calibration standard)한 후 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성하고, 시험용액의 크로마토그램으로부터 정량이온(Quantitative ion)의 각 피크 높이 또는 피크 면적에 따라 각각 정량한다.

나) 정량한계

아미트라즈(amitraz): 0.001 mg/kg

(돼지 : 0.005 mg/kg)

2,4-디메틸아닐린(2,4-Dimethylaniline): 0.005 mg/kg(돼지, 소 : 0.01 mg/kg)

8.3.114 ∼ 8.3.117 (생   략)

8.3.114 ∼ 8.3.117 (현행과 같음)

<신  설>

<신  설>

<신   설>

<신   설>

8.3.118 에마멕틴(Emamectin)

1) 시험법 적용범위

수산물 등에 적용한다.

2) 분석원리

검체 중 분석대상물질을 초산암모늄, EDTA(Ethylene Diamine Tetra Acetate, 아세토니트릴, 염화나트륨으로 추출하여 PSA (Primary Secondary Amine), C18, 황산마그네슘(MgSO4)로 정제한 후 액체크로마토그래프/질량분석기로 분석한다.

3) 장치

액체크로마토그래프/질량분석기(LC-MS/MS)

4) 시약 및 시액

가) 용매: 액체크로마토그래프용 또는 이와 동등한 것

나) 물: 3차 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 표준원액: 에마멕틴 B1a 표준품을 정밀히 달아 메탄올에 녹여 100 mg/L가 되게 한다. 조제된 표준원액은 냉동 보관한다.

라) 표준용액: 표준원액을 50% 메탄올로 희석하여 적당한 농도가 되게 한다.

마) 0.1% 개미산(Formic acid) : 1,000 mL 용량플라스크에 개미산 1 mL을 넣고 물로 표시선까지 채운다.

바) 0.1% 개미산을 함유한 메탄올 : 1,000 mL 용량플라스크에 개미산 1 mL을 넣고 메탄올로 표시선까지 채운다.

사) 추출용액 (50 mM ammonium acetate buffer (pH 4.1), 0.1 M EDTA): 500 mL 용량플라스크에 물을 적당히 넣은 뒤 초산암모늄 1,927 mg을 넣고 잘 섞어준다. 물로 표선을 맞추고 초산으로 pH를 조정한 후, EDTA 14.6 g을 넣고 충분히 녹을 때까지 초음파분쇄한다 (약 1시간, 상온에서 보관하며 상층액만 사용).

아) 기타시약 : 특급 또는 이와 동등한 것

5) 시험용액의 조제

균질화한 검체 5 g을 50 mL 원심분리관에 취하고, 추출용액 4 mL를 가한 후 1분간 진탕한다. 여기에 아세토니트릴 12 mL와 염화나트륨 2 g을 가한 뒤 10분간 진탕하고 4℃에서 2,700 G로 10분간 원심분리한다. 상층액을 37.5 mg PSA, 37.5 mg C18, 225 mg MgSO4가 담겨진 15 mL 원심분리관에 취하여 1분간 진탕하고 4℃에서 2,700 G로 10분간 원심분리한다. 상층액을 새로운 15 mL 원심분리관에 취하여 50°C에서 질소농축한 후 잔류물에 메탄올 0.5 mL와 0.1% 개미산 0.5 mL를 가하여 재분산하여 1분간 진탕하고 5분간 초음파처리한 후 4℃에서 13,500 G로 3분간 원심분리한다. 원심분리된 상층액을 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 액체크로마토그래프 측정조건

(1) 칼럼: Phenomenex Luna C18(2.0 × 150 mm, 5 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상 :

(가) 이동상 A : 0.1% 개미산

(나) 이동상 B : 0.1% 개미산을 함유한 메탄올

시간(분)	이동상 A(%)	이동상 B(%)
0	25	75
15	25	75

(3) 유속 : 0.25 mL/분

(4) 칼럼온도 : 40℃

(5) 주입량 : 3 μL

나) 질량분석기 조건

(1) Ionization : ESI (positive)

(2) Capillary temperature : 400℃

(3) Collision gas : N2 (질소)

(4) 분석대상물질의 개별 조건

물질명 (Compound)	머무름 시간 (분)	분자량	선구이온 (Precusor ion, m/z)	생성이온 (Fragment ion, m/z)	충돌 에너지 (Collision Energy, eV)
에마멕틴 B1a (Emamectin)	3.99	886.13	887	158.1	51
				81.9	103
				126.1	65

※ 밑줄 표시 되어 있는 것은 정량이온이며 그 외 이온은 정성이온임

※ 각 생성이온(Product ion)에 대한 질량분석기의 기기조건은 사용기기의 최적값으로 변경하여 사용할 수 있으며, 제시된 이외의 생성이온도 적용이 가능함

7) 정성시험

가) 정성

위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크는 표준용액 피크의 머무름 시간과 비교하여 일치하여야 한다. 또한 표준용액과 시험용액의 선구이온(precursor ion) 및 생성이온(product ion)이 일치하여야 하고, 표준용액과 시험용액의 생성이온간 반응세기의 비율(response ratio)을 비교하여 그 비율은 주1)과 일치하여야 한다.

주1). 생성이온간 반응세기의 비율 허용범위

이온간 반응세기의 비율(%)	허용범위
> 50 %	≤ 20 %
> 20 %, ≤ 50 %	≤ 25 %
> 10 %, ≤ 20 %	≤ 30 %

나) 표준품 크로마토그램

그림 1. 에마멕틴 표준품의 크로마토그램(0.005 mg/kg, 3.99분)

8) 정량시험

가) 정량

정성시험과 똑같은 조건에서 표준용액을 일정농도로 제조한 후 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성하고, 시험용액의 크로마토그램으로부터 정량이온(quantitative ion)의 각 피크 높이 또는 피크 면적에 따라 각각 정량한다.

나) 정량한계

에마멕틴(Emamaectin) : 0.005 mg/kg

8.3.119 디클로페낙(Diclofenac), 메토서페이트(Metoserpate), 부퀴놀레이트 (Buquinolate)

1) 시험법 적용범위

축산물 등에 적용한다.

2) 분석원리

검체 중의 분석대상물질을 개미산암모늄이 함유된 아세토니트릴로 추출하고 헥산으로 정제한 후 액체크로마토그래프/질량분석기로 분석한다.

3) 장치

액체크로마토그래프/질량분석기(LC-MS/MS)

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 액체크로마토그래프용 또는 이와 동등한 것

나) 물 : 3차 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 표준원액 : 100 mL 용량플라스크에 각 표준품을 정밀히 달아 메탄올에 녹여 100 mg/L가 되게 한다. 조제된 표준원액은 냉동 보관한다.

라) 혼합표준용액 : 100 mL 용량플라스크에 각 표준원액을 메탄올로 희석하여 적당한 농도가 되게 하여 사용한다.

마) 0.1% 아세트산(Acetic acid) 용액 : 1,000 mL 용량플라스크에 아세트산 1 mL을 넣고 물로 표시선까지 채운다.

바) 0.1% 개미산(Formic acid)을 함유한 아세토니트릴 : 1,000 mL 용량플라스크에 개미산 1 mL을 넣고 아세토니트릴로 표시선까지 채운다.

바) 기타시약 : 특급 또는 이와 동등한 것

5) 시험용액의 조제

균질화된 검체 2 g을 50 mL 원심분리관에 취하고 0.1% 개미산을 함유한 아세토니트릴을 10 mL을 가하여 10분간 진탕 혼합한 후 4℃에서 2,600 G로 15분간 원심 분리한다. 상층액을 50 mL 원심분리관에 취하여 헥산 10 mL을 넣고 10분간 진탕 혼합한 후 4℃에서 2,600 G로 15분간 원심분리한다. 하층액을 15 mL 원심분리관에 담아 40℃ 수용액상에서 0.3 mL가 될 때까지 질소농축한 후 0.1% 아세트산용액:메탄올(1:1, v/v) 혼합용액 1.7 mL을 가하여 재분산한다. 4℃에서 15,000 G로 10분간 원심분리 한 후 상층액을 0.45 μm 막 여과지(PTFE membrane filter)로 여과시킨 것을 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 액체크로마토그래프 측정조건

(1)	칼럼：C18 (Phenomenex Luna 2.0 × 100 mm, 3.0 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상

(가) 이동상 A : 0.1% 아세트산 용액

(나) 이동상 B : 메탄올

시간(분)	이동상 A(%)	이동상 B(%)
0	90	10
3	90	10
5	10	90
13	10	90
15	90	10
20	90	10

(3) 유속 : 0.25 mL/분

(4) 칼럼온도 : 30℃

(5) 주입량 : 10 μL

나) 질량분석기 조건

(1) Ionization : ESI(positive, negative)

(2) Capillary Temperature : 350℃

(3) Collision gas : N2(질소)

(4) 분석대상물질의 개별 조건(MRM 조건)

연번	물질명 (Compound)	이온화 (Ionization mode)	머무름 시간 (분)	분자량 (MW)	선구이온 (Precusor ion, m/z)	생성이온 (Product ion, m/z)	충돌 에너지 (Collision Energy,eV)
1	디클로페낙 (Diclofenac)	Negative	12.58	296.1	293.7	250.0	-12
						214.0	-28
						178.0	-38
2	메토서페이트 (Metoserpate)	Positive	9.03	428.5	429.1	174.1	41
						131.1	89
						130.0	119
3	부퀴놀레이트 (Buquinolate)	Positive	12.19	361	362.1	204.0	49
						316.2	23
						148.1	65

※ 밑줄 표시 되어 있는 것은 정량이온이며 그 외 이온들은 정성이온임

※ 각 생성이온(Product ion)에 대한 질량분석기의 기기조건은 사용기기의 최적값으로 변경하여 사용할 수 있으며, 제시된 이외의 생성이온도 적용이 가능함

7) 정성시험

가) 정성

위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크는 표준용액 피크의 머무름 시간과 비교하여 일치하여야 한다. 또한 표준용액과 시험용액의 선구이온(precursor ion) 및 생성이온(product ion)이 일치하여야 하고, 표준용액과 시험용액의 생성이온간 반응세기의 비율(response ratio)을 비교하여 그 비율은 주1)과 일치하여야 한다.

주1). 생성이온간 반응세기의 비율 허용범위

이온간 반응세기의 비율(%)	허용범위
> 50 %	≤ 20 %
> 20 %, ≤ 50 %	≤ 25 %
> 10 %, ≤ 20 %	≤ 30 %

나) 표준품 크로마토그램

디클로페낙 (12.5분)

메토서페이트 (9.03분)

부퀴놀레이트 (12.19분)

그림 1. 디클로페낙, 메토서페이트, 부퀴놀레이트 표준품의 크로마토그램(각 0.005 mg/L)

8) 정량시험

가) 정량

정성시험과 똑같은 조건에서 표준용액을 일정농도로 제조한 후 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성하고, 시험용액의 크로마토그램으로부터 정량이온(quantitative ion)의 각 피크 높이 또는 피크 면적에 따라 각각 정량한다.

나) 정량한계

디클로페낙(Diclofenac) : 0.002 mg/kg

메토서페이트(Metoserpate) : 0.001 mg/kg

부퀴놀레이트(Buquinolate) : 0.001 mg/kg

8.3.120 가미스로마이신(Gamithromycin), 설파니트란(Sulfanitran), 설파피리딘(Sulfapyridine)

1) 시험법 적용범위

축산물 등에 적용한다.

2) 분석원리

검체 중 분석대상물질을 아세토니트릴, 염화나트륨으로 추출하고 PSA(Primary Secondary Amine), C18, 황산마그네슘(MgSO4)로 정제한 후 액체크로마토그래프/질량분석기로 분석한다.

3) 장치

액체크로마토그래프/질량분석기(LC-MS/MS)

4) 시약 및 시액

가) 용매: 액체크로마토그래프용 또는 이와 동등한 것

나) 물: 3차 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 표준원액: 100 mL 용량플라스크에 각 표준품을 정밀히 달아 메탄올에 녹여 100 mg/L가 되게 한다. 조제된 표준원액은 냉동 보관한다.

라) 혼합 표준용액: 100 mL 용량플라스크에 각 표준원액을 50% 메탄올로 희석하여 적당한 농도가 되게 하여 사용한다.

마) 0.1% 개미산(Formic acid) 용액: 1,000 mL 용량플라스크에 개미산 1 mL를 넣고 물로 표시선까지 채운다.

바) 0.1% 개미산 함유 메탄올: 1,000 mL 용량플라스크에 개미산 1 mL을 넣고 메탄올로 표시선까지 채운다.

사) 기타시약: 특급 또는 이와 동등한 것

5) 시험용액의 조제

균질화한 검체 2 g을 15 mL 원심분리관에 취하고, 아세토니트릴 5 mL와 염화나트륨 1 g을 가한다. 이를 10분간 진탕 혼합한 후 4℃에서 2,700 G로 10분간 원심분리한다. 상층액을 25 mg PSA, 25 mg C18, 150 mg MgSO4가 담겨진 15 mL 원심분리관에 취하여 1분간 진탕하고 4℃에서 2,700 G로 10분간 원심분리한다. 상층액을 취하여 40°C에서 질소농축한 후 잔류물에 0.1% 개미산 함유 메탄올 0.5 mL와 0.1% 개미산 용액 0.5 mL로 재분산한다. 이를 5분간 초음파처리한 후 4℃에서 13,500 G로 3분간 원심분리한 후 상층액을 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 액체크로마토그래프 측정조건

(1) 칼럼: C18 (Phenomenex Luna 2.0 × 150 mm, 5 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상

(가) 이동상 A: 0.1% 개미산 용액

(나) 이동상 B: 0.1% 개미산 함유 메탄올

시간(분)	이동상 A(%)	이동상 B(%)
0	90	10
5	20	80
9	20	80
10	90	10
15	90	10

(3) 유속: 0.25 mL/분

(4) 칼럼온도: 40℃

(5) 주입량: 10 μL

나) 질량분석기 조건

(1) Ionization: ESI (Positive, Negative)

(2) Capillary Temperature: 350℃

(3) Collision gas: N2(질소)

(4) 분석대상물질의 개별 조건

연번	물질명 (Compound)	이온화 (Ionization mode	머무름 시간 (분)	분자량 (MW)	선구이온 (Precursor ion, m/z)	생성이온 (Product ion, m/z)	충돌 에너지 (Collision Energy, eV)
1	가미스로마이신 (Gamithromycin)	Positive	7.15	777.04	389.304	83.20	37
						72.00	71
						55.10	75
2	설파니트란 (Sulfanitran)	Negative	9.25	335.34	333.998	136.40	-44
						133.10	-36
						226.90	-42
3	설파피리딘 (Sulfapyridine)	Positive	6.05	249.29	250.112	92.10	39
						155.90	19
						64.80	57

※ 밑줄 표시 되어 있는 것은 정량이온이며 그 외 이온은 정성이온임

※ 각 생성이온(Product ion)에 대한 질량분석기의 기기조건은 사용기기의 최적값으로 변경하여 사용할 수 있으며, 제시된 이외의 생성이온도 적용이 가능함

7) 정성시험

가) 정성

위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크는 표준용액 피크의 머무름 시간과 비교하여 일치하여야 한다. 또한 표준용액과 시험용액의 선구이온(Precursor ion) 및 생성이온(Product ion)이 일치하여야 하고, 표준용액과 시험용액의 생성이온간 반응세기의 비율(Response ratio)을 비교하여 그 비율이 주1)과 일치하여야 한다.

주1. 생성이온간 반응세기의 비율 허용범위

이온간 반응세기의 비율(%)	허용범위
> 50%	≤ 20%
> 20%, ≤ 50%	≤ 25%
> 10%, ≤ 20%	≤ 30%

나) 표준품 크로마토그램

가미스로마이신(7.15분)

설파니트란(9.27분)

설파피리딘(6.06분)

그림 1. 가미스로마이신, 설파니트란, 설파피리딘 표준품의 크로마토그램 (각 0.005 mg/L)

8) 정량시험

가) 정량

정성시험과 똑같은 조건에서 표준용액을 일정농도로 제조한 후 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성하고, 시험용액의 크로마토그램으로부터 정량이온(quantitative ion)의 각 피크 높이 또는 피크 면적에 따라 각각 정량한다.

나) 정량한계

가미스로마이신: 0.005 mg/kg

설파니트란: 0.005 mg/kg

설파피리딘: 0.005 mg/kg

8.3.121 이소플루프레돈아세테이트(Isoflupredone acetate)

1) 시험법 적용범위

축·수산물 등에 적용한다.

2) 분석원리

검체 중의 분석대상물질을 0.1% 아세트산 함유 아세토니트릴로 추출하고 헥산으로 정제한 후 액체크로마토그래프/질량분석기로 분석한다.

3) 장치

액체크로마토그래프/질량분석기(LC-MS/MS)

4) 시약 및 시액

가) 용매 : 액체크로마토그래프용 또는 이와 동등한 것

나) 물 : 3차 증류수 또는 이와 동등한 것

다) 표준원액 : 100 mL 용량플라스크에 각 표준품을 정밀히 달아 메탄올에 녹여 100 mg/L가 되게 한다. 조제된 표준원액은 냉동 보관한다.

라) 혼합표준용액 : 100 mL 용량플라스크에 각 표준원액을 메탄올로 희석하여 적당한 농도가 되게 하여 사용한다.

마) 0.1% 아세트산(Acetic acid) 용액 : 1,000 mL 용량플라스크에 아세트산 1 mL를 넣고 물로 표시선까지 채운다.

바) 0.1% 아세트산 함유 메탄올 : 1,000 mL 용량 플라스크에 아세트산 1 mL를 넣고 메탄올로 표시선까지 채운다.

사) 기타시약 : 특급 또는 이와 동등한 것

5) 시험용액의 조제

균질화한 검체 5 g을 50 mL 원심분리관에 취하고 0.1% 아세트산 함유 아세토니트릴을 8 mL를 가한다. 이를 10분간 진탕 혼합한 후 4℃에서 2,600 G로서 15분간 원심 분리하여 상층액 ⓐ를 취한다. 잔류물에 다시 0.1% 아세트산 함유 아세토니트릴 7 mL를 가하여 10분간 진탕한 후 4℃에서 2,600 G로서 15분간 원심분리하여 상층액 ⓑ를 취한다. 새로운 50 mL 원심분리관에 상층액 ⓐ와 ⓑ를 합한 후 헥산 15 mL 넣고 10분간 진탕하고 4℃에서 2,600  G로 15분간 원심분리한다. 하층액을 취하여 40℃ 수용액상에서 0.3 mL가 될 때까지 질소농축 한 후 0.1% 아세트산 용액:0.1% 아세트산 함유 메탄올(1:1, v/v) 혼합용액 2.2 mL를 가하여 재분산한다. 4℃에서 15,000 G로 10분간 원심분리 한 후 상응액을 0.45 μm 막여과지(PTFE membrane filter)로 여과시킨 것을 시험용액으로 한다.

6) 시험조작

가) 액체크로마토그래프 측정조건

(1) 칼럼： C18 (Xbridge 2.1 × 100 mm, 3.5 μm) 또는 이와 동등한 것

(2) 이동상

(가) 이동상 A : 0.1% 아세트산 용액

(나) 이동상 B : 0.1% 아세트산 함유 메탄올

시간(분)	이동상 A(%)	이동상 B(%)
0	95	5
3	95	5
5	5	95
13	5	95
15	95	5
20	95	5

(3) 유속 : 0.25 mL/분

(4) 칼럼온도 : 30℃

(5) 주입량 : 10 μL

나) 질량분석기 조건

(1) Ionization : ESI(Positive)

(2) Capillary Temperature : 350℃

(3) Collision gas : N2(질소)

(4) 분석대상물질의 개별 조건

물질명 (Compound)	머무름 시간 (분)	분자량	선구이온 (Precursor ion, m/z)	생성이온 (Product ion, m/z)	충돌 에너지 (Collision Energy, eV)
이소플루프레돈 아세테이트 (Isoflupredone acetate)	10.51	420.47	421.246	237.30	25
				341.30	17
				147.10	31

※ 밑줄 표시 되어 있는 것은 정량이온이며 그 외 이온들은 정성이온임

※ 각 생성이온(Product ion)에 대한 질량분석기의 기기조건은 사용기기의 최적값으로 변경하여 사용할 수 있으며, 제시된 이외의 생성이온도 적용이 가능함

7) 정성시험

가) 위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크는 표준용액 피크의 머무름 시간과 비교하여 일치하여야 한다. 또한 표준용액과 시험용액의 선구이온(Precursor ion) 및 생성이온(Product ion)이 일치하여야 하고, 표준용액과 시험용액의 생성이온간 반응세기의 비율(Response ratio)을 비교하여 그 비율이 주1)과 일치하여야 한다.

주1. 생성이온간 반응세기의 비율 허용범위

이온간 반응세기의 비율(%)	허용범위
> 50 %	± 20 %
> 20 %, ≤ 50 %	± 25 %
> 10 %, ≤ 20 %	± 30 %

이소플루프레돈아세테이트(10.51분)

나) 표준품 크로마토그램

그림 1. 이소플루프레돈아세테이트 표준품의 크로마토그램 (0.05 mg/L)

8) 정량시험

가) 정량

정성시험과 똑같은 조건에서 표준용액을 일정농도로 제조한 후 얻어진 크로마토그램상의 각 피크 높이 또는 면적을 구하여 검량선을 작성하고, 시험용액의 크로마토그램으로부터 정량이온(Quantitative ion)의 각 피크 높이 또는 피크 면적에 따라 각각 정량한다.

나) 정량한계

이소플루프레돈아세테이트(Isoflupredone acetate) :  0.002  mg/kg

9. ∼ 12. (생   략)

9. ∼ 12. (현행과 같음)

[별표 1] ∼ [별표 2] (생   략)

[별표 1] ∼ [별표 2] (현행과 같음)

[별표 3] 농산물의 농약 잔류허용기준

(1) ∼ (19) (생   략)

(20) 다이쾃(Diquat)

(생   략)

<신    설>

(21) ∼ (54) (생   략)

(55) 뷰프로페진(Buprofezin)

(생   략)

<신    설>

(56) ∼ (68) (생   략)

(69) 사이헥사틴(Cyhexatin)

(생   략)

<신    설>

(70) ∼ (89) (생   략)

(90) 엔도설판(Endosulfan)

(생   략)

<신    설>

(91) ∼ (95) (생   략)

(96) 옥사밀(Oxamyl)

(생   략)

감자	0.1T

(97) 옥시풀루오르펜(Oxyfluorfen)

(생   략)

(98) ∼ (100) (생   략)

(101) 이미다클로프리드(Imidacloprid)

(생   략)

<신    설>

(102) ∼ (110) (생   략)

(111) 카바릴(Carbaryl∶NAC)

(생   략)

<신    설>

(112) ∼ (115) (생   략)

(116) 카탑(Cartap)

(생   략)

<신    설>

(117) ∼ (132) (생   략)

(133) 테부코나졸(Tebuconazole)

(생   략)

배추	0.05

<신    설>

(134) (생   략)

(135) 터부포스(Terbufos)

(생   략)

<신    설>

(136) ∼ (155) (생   략)

(156) 파클로부트라졸(Paclobutrazol)

(생   략)

<신    설>

(157) ∼ (172) (생   략)

(173) 포레이트(Phorate)

(생   략)

<신    설>

<신    설>

<신    설>

(174) ∼ (205) (생   략)

(206) 클로르페나피르(Chlorfenapyr)

(생   략)

<신    설>

(207) ∼ (209) (생   략)

(210) 페나자퀸(Fenazaquin)

(생   략)

감귤	0.7

(211) ∼ (233) (생   략)

(234) 펜피록시메이트(Fenpyroximate)

(생   략)

감귤	0.5

<신    설>

(235) ∼ (237) (생   략)

(238) 플루디옥소닐(Fludioxonil)

(생   략)

감자	0.02

<신    설>

(239) ∼ (245) (생   략)

(246) 스피노사드(Spinosad)

(생   략)

<신    설>

<신    설>

<신    설>

(247) (생   략)

(248) 아바멕틴(Abamectin)

(생   략)

<신    설>

(249) 에마멕틴 벤조에이트(Emamectin benzoate)

(생   략)

<신    설>

(250) ∼ (258) (생   략)

(259) 피리메타닐(Pyrimethanil)

(생   략)

<신    설>

(260) ∼ (289) (생   략)

(290) 인독사카브(Indoxacarb)

(생   략)

체리	0.3

<신    설>

<신    설>

<신    설>

(291) (생   략)

(292) 퀸클로락(Quinclorac)

(생   략)

<신    설>

(293) ∼ (308) (생   략)

(309) 플루톨라닐(Flutolanil)

(생   략)

<신    설>

(310) ∼ (322) (생   략)

(323) 보스칼리드(Boscalid)

(생   략)

수박	0.3

(324) ∼ (331) (생   략)

(332) 클로티아니딘(Clothianidin)

(생   략)

<신    설>

(333) ∼ (351) (생   략)

(352) 메톡시페노자이드(Methoxyfenozide)

(생   략)

<신    설>

(353) ∼ (356) (생   략)

(357) 디티오카바메이트(Dithiocarbamates)

(생   략)

<신    설>

(358) ∼ (369) (생   략)

(370) 벤티아발리카브아이소프로필(Benthiavalicarb-isopropyl)

(생   략)

오이	0.07

(371) ∼ (402) (생   략)

(403) 메타플루미존(Metaflumizone)

(생   략)

<신    설>

(404) 메트라페논(Metrafenone)

(생   략)

<신    설>

<신    설>

(405) ∼ (407) (생   략)

(408) 스피네토람(Spinetoram)

(생   략)

<신    설>

(409) ∼ (420) (생   략)

(421) 레피멕틴(Lepimectin)

(생   략)

<신    설>

(422) ∼ (432) (생   략)

(433) 사이안트라닐리프롤(Cyantraniliprole)

(생   략)

복숭아	0.3

(434) (생   략)

(435) 펜피라자민(Fenpyrazamine)

(생   략)

<신    설>

(436) (생   략)

(437) 플룩사피록사드(Fluxapyroxad)

(생   략)

<신    설>

(438) ∼ (440) (생   략)

(441) 피리벤카브(Pyribencarb)

(생   략)

고추	0.05

피망	0.05

(442) 플루피라디퓨론(Flupyradifurone)

(생   략)

브로콜리	6.0†

(443) ∼ (458) (생   략)

(459) 피플루뷰마이드(Pyflubumide)

(생   략)

<신    설>

<신    설>

<신    설>

(460) 피카뷰트라족스(Picarbutrazox)

(생   략)

<신    설>

<신    설>

(461) 벤조빈디플루피르(Benzovindiflupyr)

(생   략)

<신    설>

<신    설>

<신    설>

<신    설>

<신    설>

(462) ∼ (464) (생   략)

(465) 톨펜피라드(Tolfenpyrad)

(생   략)

<신    설>

(466) (생   략)

<신    설>

<신    설>

<신    설>

[별표 3] 농산물의 농약 잔류허용기준

(1) ∼ (19) (현행과 같음)

(20) 다이쾃(Diquat)

(현행과 같음)

대두	0.3†

(21) ∼ (54) (현행과 같음)

(55) 뷰프로페진(Buprofezin)

(현행과 같음)

레몬	2.5†

(56) ∼ (68) (현행과 같음)

(69) 사이헥사틴(Cyhexatin)

(현행과 같음)

머위	15

(70) ∼ (89) (현행과 같음)

(90) 엔도설판(Endosulfan)

(현행과 같음)

근채류	0.1T

(91) ∼ (95) (현행과 같음)

(96) 옥사밀(Oxamyl)

(현행과 같음)

감자	0.1†

(97) 옥시플루오르펜(Oxyfluorfen)

(현행과 같음)

(98) ∼ (100) (현행과 같음)

(101) 이미다클로프리드(Imidacloprid)

(현행과 같음)

망고스틴	0.4†

(102) ∼ (110) (현행과 같음)

(111) 카바릴(Carbaryl∶NAC)

(현행과 같음)

두리안	30†

(112) ∼ (115) (현행과 같음)

(116) 카탑(Cartap)

(현행과 같음)

엇갈이배추	2.0

(117) ∼ (132) (현행과 같음)

(133) 테부코나졸(Tebuconazole)

(현행과 같음)

배추	0.2

엇갈이배추	0.7

(134) (현행과 같음)

(135) 터부포스(Terbufos)

(현행과 같음)

엇갈이배추	0.05

(136) ∼ (155) (현행과 같음)

(156) 파클로부트라졸(Paclobutrazol)

(현행과 같음)

배추	0.7

(157) ∼  (172) (현행과 같음)

(173) 포레이트(Phorate)

(현행과 같음)

배추	0.05

생강	0.05

엇갈이배추	0.05

(174) ∼ (205) (현행과 같음)

(206) 클로르페나피르(Chlorfenapyr)

(현행과 같음)

망고	0.1

(207) ∼ (209) (현행과 같음)

(210) 페나자퀸(Fenazaquin)

(현행과 같음)

감귤	2.0

(211) ∼ (233) (현행과 같음)

(234) 펜피록시메이트(Fenpyroximate)

(현행과 같음)

<삭    제>

감귤류	0.5†

(235) ∼ (237) (현행과 같음)

(238) 플루디옥소닐(Fludioxonil)

(현행과 같음)

감자	5.0†

풋마늘	0.05

(239) ∼ (245) (현행과 같음)

(246) 스피노사드(Spinosad)

(현행과 같음)

망고	0.1

아몬드	0.07†

오렌지	0.3†

(247) (현행과 같음)

(248) 아바멕틴(Abamectin)

(현행과 같음)

레몬	0.02†

(249) 에마멕틴 벤조에이트(Emamectin benzoate)

(현행과 같음)

망고	0.05

(250) ∼ (258) (현행과 같음)

(259) 피리메타닐(Pyrimethanil)

(현행과 같음)

엇갈이배추	0.1

(260) ∼ (289) (현행과 같음)

(290) 인독사카브(Indoxacarb)

(현행과 같음)

체리	0.9†

멜론	0.5†

크랜베리	1.0†

토마토	0.3†

(291) (현행과 같음)

(292) 퀸클로락(Quinclorac)

(현행과 같음)

크랜베리	1.5†

(293) ∼ (308) (현행과 같음)

(309) 플루톨라닐(Flutolanil)

(현행과 같음)

감자	0.15†

(310) ∼ (322) (현행과 같음)

(323) 보스칼리드(Boscalid)

(현행과 같음)

수박	0.7

(324) ∼ (331) (현행과 같음)

(332) 클로티아니딘(Clothianidin)

(현행과 같음)

두리안	0.9†

(333) ∼ (351) (현행과 같음)

(352) 메톡시페노자이드(Methoxyfenozide)

(현행과 같음)

아보카도	0.7†

(353) ∼ (356) (현행과 같음)

(357) 디티오카바메이트(Dithiocarbamates)

(현행과 같음)

용안	15†

(358) ∼ (369) (현행과 같음)

(370) 벤티아발리카브아이소프로필(Benthiavalicarb-isopropyl)

(현행과 같음)

오이	0.3

(371) ∼ (402) (현행과 같음)

(403) 메타플루미존(Metaflumizone)

(현행과 같음)

자두	0.1

(404) 메트라페논(Metrafenone)

(현행과 같음)

건삼	0.3

수삼	0.1

(405) ∼ (407) (현행과 같음)

(408) 스피네토람(Spinetoram)

(현행과 같음)

망고	0.05

(409) ∼ (420) (현행과 같음)

(421) 레피멕틴(Lepimectin)

(현행과 같음)

배추	0.05

(422) ∼ (432) (현행과 같음)

(433) 사이안트라닐리프롤(Cyantraniliprole)

(현행과 같음)

복숭아	1.5†

(434) (현행과 같음)

(435) 펜피라자민(Fenpyrazamine)

(현행과 같음)

가지	1.0

(436) (현행과 같음)

(437) 플룩사피록사드(Fluxapyroxad)

(현행과 같음)

엇갈이배추	0.05

(438) ∼ (440) (현행과 같음)

(441) 피리벤카브(Pyribencarb)

(현행과 같음)

고추	2.0

피망	2.0

(442) 플루피라디퓨론(Flupyradifurone)

(현행과 같음)

브로콜리(콜리플라워 포함) 6.0†

(443) ∼ (458) (현행과 같음)

(459) 피플루뷰마이드(Pyflubumide)

(현행과 같음)

고추	1.0

오이	0.3

참외	0.2

(460) 피카뷰트라족스(Picarbutrazox)

(현행과 같음)

참외	0.5

토마토	2.0

(461) 벤조빈디플루피르(Benzovindiflupyr)

(현행과 같음)

두류	0.2†

유채씨	0.15†

인과류	0.2†

커피원두	0.15†

포도	1.0†

(462) ∼ (464) (현행과 같음)

(465) 톨펜피라드(Tolfenpyrad)

(현행과 같음)

체리	2.0†

(466) (현행과 같음)

(467) 플룩사메타마이드(Fluxametamide)

◎ 잔류물의 정의 : Fluxametamide

고추	1.0

배추	2.0

복숭아	2.0

사과	0.5

수박	0.05

엇갈이배추	5.0

오이	0.3

참외	0.3

토마토	0.5

파	3.0

피망	1.0

(468) 티아페나실(Tiafenacil)

◎ 잔류물의 정의 : Tiafenacil, tiafenacil M36 및 tiafenacil M56의 합을 tiafenacil로 함

감	0.05

감귤	0.05

밤	0.05

복숭아	0.05

사과	0.05

포도	0.05

(469) 플루트리아폴(Flutriafol)

◎ 잔류물의 정의 : Flutriafol

바나나	0.3†

[별표 4]  (생   략)

[별표 4] (현행과 같음)

[별표 5] 식품 중 동물용의약품의 잔류허용기준

(1) ∼ (3) (생   략)

(4) 노보비오신(Novobiocin) : 항균제

(생  략)

<신    설>

(5) ∼ (67) (생   략)

(68) 델타메트린(Deltamethrin) : 살충제

(생  략)

닭근육	0.03

닭간	0.05

닭지방	0.5

닭신장	0.05

<신  설>

(69) ∼ (74) (생   략)

(75) 트리클로르폰(Trichlorfon, Metrifonate) : 구충제

(생  략)

<신    설>

<신    설>

<신    설>

<신    설>

<신    설>

<신    설>

<신    설>

<신    설>

<신    설>

<신    설>

<신    설>

(76) ∼ (120) (생   략)

(121) 사이퍼메트린(Cypermethrin) : 살충제

(생  략)

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

(122) ∼ (191) (생   략)

(192) 프로폭서(Propoxur) : 살충제

(생  략)

닭근육	0.01

<신  설>

<신  설>

(193) (생   략)

[별표 5] 식품 중 동물용의약품의 잔류허용기준

(1) ∼ (3) (현행과 같음)

(4) 노보비오신(Novobiocin) : 항균제

(현행과 같음)

유	0.01

(5) ∼ (67) (현행과 같음)

(68) 델타메트린(Deltamethrin) : 살충제

(현행과 같음)

가금근육	0.03

가금간	0.05

가금지방	0.5

가금신장	0.05

돼지근육	0.01

(69) ∼ (74) (현행과 같음)

(75) 트리클로르폰(Trichlorfon, Metrifonate) : 구충제

(현행과 같음)

염소근육	0.05

염소간	0.05

염소지방	0.05

염소신장	0.05

말근육	0.05

말간	0.05

말지방	0.05

말신장	0.05

가금근육	0.01

알	0.01

어류	0.01

(76) ∼ (120) (현행과 같음)

(121) 사이퍼메트린(Cypermethrin) : 살충제

(현행과 같음)

돼지근육	0.05

돼지간	0.05

돼지지방	0.2

돼지신장	0.05

말근육	0.05

말간	0.05

말지방	0.2

말신장	0.05

토끼근육	0.05

토끼간	0.05

토끼지방	0.2

토끼신장	0.05

가금근육	0.05

알	0.05

(122) ∼ (191) (현행과 같음)

(192) 프로폭서(Propoxur) : 살충제

(현행과 같음)

가금근육	0.01

양근육	0.05

염소근육	0.05

(193) (현행과 같음)

[별표 6] (생   략)

[별표 6] (현행과 같음)

신․ 구조문 대비표